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wensome

木虫 (正式写手)

[求助] 激光共聚焦显微镜激发光源与荧光仪最大激发波长不同

题目有些绕,我仔细说说我遇到的情况:我的一个荧光探针,在荧光仪上最大激发波长是380,最大发射是505。做细胞的时候由于实验室的激光共聚焦显微镜只有一个488的光源,于是试着激发了一下细胞,发现竟然可以激发,细胞染色,且效果还挺好。我的问题:在荧光仪上488几乎不能激发探针,最大激发在380,但是为啥在激光共聚焦显微镜下用488的激光光源可以激发细胞??这种情况正常否?

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conanzzz

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
137167741: 小木虫交流,共同进步~~ 2013-11-28 14:51:13
那用荧光仪扫激发谱是什么情况
2楼2013-11-28 10:59:57
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wensome

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by conanzzz at 2013-11-28 10:59:57
那用荧光仪扫激发谱是什么情况

扫激发,最大激发在380左右

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2013-11-28 14:10:23
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conanzzz

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wensome at 2013-11-28 14:10:23
扫激发,最大激发在380左右
...

激发谱里面488完全不能激发么?还是说没有380激发的强;按说荧光仪的灵敏度更高
4楼2013-11-28 14:47:33
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wensome

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by conanzzz at 2013-11-28 14:47:33
激发谱里面488完全不能激发么?还是说没有380激发的强;按说荧光仪的灵敏度更高...

荧光激发488完全不能激发。我在考虑是不是老师把信号检测放到最大导致的呢
5楼2013-11-30 13:32:28
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conanzzz

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by wensome at 2013-11-30 13:32:28
荧光激发488完全不能激发。我在考虑是不是老师把信号检测放到最大导致的呢...

会不会共聚焦那块儿的参数不对,488激发是假象
6楼2013-12-02 14:07:47
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doglet

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

阴性对照发光吗,如果发光说明假阳性,还有共聚焦的488的激发光谱是多少至多少,会不会有少量重叠
7楼2013-12-02 15:14:26
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loveford

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

可能是因为你的荧光380-505之间,而confocal的488在这个范围内,所以可以激发的细胞。猜测的,希望可以帮到你~
8楼2013-12-02 15:31:08
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错季的守望

金虫 (著名写手)

我也遇到了同样问题,请问您后面怎么解决呢

发自小木虫Android客户端
9楼2017-05-18 10:23:11
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