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施子墨

金虫 (正式写手)


[交流] 免疫组织化学的片子怎么分析?有没有专业的大侠帮我看下我拍的片子有什么问题

我做的组化的片子~
不知道怎么分子
怎么看抗体结合的效果、还有就是染色什么的
还有什么方面是不对的或者需要改的
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大雨中的狼

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
感觉颜色有点怪诶,阴阳对比明显吗?我也要做免疫组化,正在学习中,帮你顶啦
2楼2013-11-27 19:34:06
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zh10246

铁杆木虫 (文坛精英)


在学习中,帮你顶
3楼2013-11-27 20:15:08
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施子墨

金虫 (正式写手)


引用回帖:
2楼: Originally posted by 大雨中的狼 at 2013-11-27 19:34:06
感觉颜色有点怪诶,阴阳对比明显吗?我也要做免疫组化,正在学习中,帮你顶啦

什么是阴阳对比?
我一个染得时间短点
颜色深的估计是染色时间太长了
我的是肺组织
4楼2013-11-29 14:29:11
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大雨中的狼

新虫 (初入文坛)


★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
施子墨: 金币+2 2013-12-08 13:05:15
引用回帖:
4楼: Originally posted by 施子墨 at 2013-11-29 14:29:11
什么是阴阳对比?
我一个染得时间短点
颜色深的估计是染色时间太长了
我的是肺组织...

免疫组化里边不是有阳性和阴性两组吗,阳性的就是加一抗,阴性就是加PBS。
我也在学,所以不太懂,你可以多看看文献,咱共同努力吧!
5楼2013-12-07 11:07:24
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施子墨

金虫 (正式写手)


引用回帖:
5楼: Originally posted by 大雨中的狼 at 2013-12-07 11:07:24
免疫组化里边不是有阳性和阴性两组吗,阳性的就是加一抗,阴性就是加PBS。
我也在学,所以不太懂,你可以多看看文献,咱共同努力吧!...

我的片子技术支持说
背景太高  我都不太懂背景高的意思
反正意思就是我的片子不对
说把组织也染了、我都不知道让谁给我讲下
现在老师们都只懂自己研究方面
6楼2013-12-07 15:27:49
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zzy129

金虫 (小有名气)


★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
施子墨: 金币+3 2013-12-08 13:05:05
引用回帖:
6楼: Originally posted by 施子墨 at 2013-12-07 15:27:49
我的片子技术支持说
背景太高  我都不太懂背景高的意思
反正意思就是我的片子不对
说把组织也染了、我都不知道让谁给我讲下
现在老师们都只懂自己研究方面
哎...

背景太深可能是因为:未用酶消化处理切片;片子过厚,黏合剂使用不当;漂洗不够彻底;底物成色反应过久;蛋白封闭不够或所用血清溶血;使用全血清抗体稀释不够或未用非免疫血清处理片子等。
7楼2013-12-07 23:25:20
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大雨中的狼

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by 施子墨 at 2013-12-07 15:27:49
我的片子技术支持说
背景太高  我都不太懂背景高的意思
反正意思就是我的片子不对
说把组织也染了、我都不知道让谁给我讲下
现在老师们都只懂自己研究方面
哎...

是说你背景颜色深了吧。我们实验室现在也只有我在做这个了,我问过以前毕业的师兄师姐,他们说影响免疫组化结果的因素很多,所以是需要摸索的,他们那时做的不错,我推荐你两篇文章,你可以看看,我觉得他们效果还不错,仅供参考....
促性腺激素受体在半滑舌鳎繁殖周期中的作用研究_陈晓燕
大泷六线鱼繁殖内分泌生理功能及GH基因部分序列的克隆_王连顺
8楼2013-12-08 22:15:03
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zb989931

铁虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你的片子是什么切的,冰冻还是石蜡?
你做的组化是什么水平的,细胞还是分子水平的?
第一,我看到你的第一张片子,上面有很多碎点点,如果你是石蜡切片,那么这些东西很可能是石蜡碎屑和组织切片的残渣。也就是说,你的切片在预处理时没有清洗干净(比如脱蜡)。
第二,如果你是做组织水平的染色,那么我看到的你的片子完全呈现均一的棕色,那么你的观察目的是什么?如果你是做的IELISA,那么图片里所有的组织均呈现同一种颜色,那么一种可能是你的实验时失败的,棕色只是非特异性结合产生的背景色,二种可能是你成功了,但是这样得到的结论是待测物在组织中广泛存在,可是。。。以我个人看来,第二种可能性不大。
第三,我看到了你最后一张片子,你使用的组织,标准情况下的切片是这个样子的么?是不是碎了?
9楼2013-12-17 16:25:12
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kinsch

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
~~~~(>_<~~~~ ,情况跟LZ一样...有解决到么?
10楼2013-12-19 22:31:02
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