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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 免疫组织化学的片子怎么分析？有没有专业的大侠帮我看下我拍的片子有什么问题
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施子墨

金虫 (正式写手)

[交流] 免疫组织化学的片子怎么分析？有没有专业的大侠帮我看下我拍的片子有什么问题

我做的组化的片子~
不知道怎么分子
怎么看抗体结合的效果、还有就是染色什么的
还有什么方面是不对的或者需要改的
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1楼 2013-11-27 15:04:33
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大雨中的狼

新虫 (初入文坛)
★
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感觉颜色有点怪诶，阴阳对比明显吗？我也要做免疫组化，正在学习中，帮你顶啦
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2楼2013-11-27 19:34:06
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zh10246

铁杆木虫 (文坛精英)
在学习中，帮你顶
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3楼2013-11-27 20:15:08
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施子墨

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 大雨中的狼 at 2013-11-27 19:34:06
感觉颜色有点怪诶，阴阳对比明显吗？我也要做免疫组化，正在学习中，帮你顶啦

什么是阴阳对比？
我一个染得时间短点
颜色深的估计是染色时间太长了
我的是肺组织
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4楼2013-11-29 14:29:11
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大雨中的狼

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
施子墨: 金币+2 2013-12-08 13:05:15
引用回帖:
4楼: Originally posted by 施子墨 at 2013-11-29 14:29:11
什么是阴阳对比？
我一个染得时间短点
颜色深的估计是染色时间太长了
我的是肺组织...

免疫组化里边不是有阳性和阴性两组吗，阳性的就是加一抗，阴性就是加PBS。
我也在学，所以不太懂，你可以多看看文献，咱共同努力吧！
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5楼2013-12-07 11:07:24
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施子墨

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 大雨中的狼 at 2013-12-07 11:07:24
免疫组化里边不是有阳性和阴性两组吗，阳性的就是加一抗，阴性就是加PBS。
我也在学，所以不太懂，你可以多看看文献，咱共同努力吧！...

我的片子技术支持说
背景太高  我都不太懂背景高的意思
反正意思就是我的片子不对
说把组织也染了、我都不知道让谁给我讲下
现在老师们都只懂自己研究方面
哎
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6楼2013-12-07 15:27:49
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zzy129

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
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施子墨: 金币+3 2013-12-08 13:05:05
引用回帖:
6楼: Originally posted by 施子墨 at 2013-12-07 15:27:49
我的片子技术支持说
背景太高  我都不太懂背景高的意思
反正意思就是我的片子不对
说把组织也染了、我都不知道让谁给我讲下
现在老师们都只懂自己研究方面
哎...

背景太深可能是因为：未用酶消化处理切片；片子过厚，黏合剂使用不当；漂洗不够彻底；底物成色反应过久；蛋白封闭不够或所用血清溶血；使用全血清抗体稀释不够或未用非免疫血清处理片子等。
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7楼2013-12-07 23:25:20
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大雨中的狼

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by 施子墨 at 2013-12-07 15:27:49
我的片子技术支持说
背景太高  我都不太懂背景高的意思
反正意思就是我的片子不对
说把组织也染了、我都不知道让谁给我讲下
现在老师们都只懂自己研究方面
哎...

是说你背景颜色深了吧。我们实验室现在也只有我在做这个了，我问过以前毕业的师兄师姐，他们说影响免疫组化结果的因素很多，所以是需要摸索的，他们那时做的不错，我推荐你两篇文章，你可以看看，我觉得他们效果还不错，仅供参考....
促性腺激素受体在半滑舌鳎繁殖周期中的作用研究_陈晓燕
大泷六线鱼繁殖内分泌生理功能及GH基因部分序列的克隆_王连顺
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8楼2013-12-08 22:15:03
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zb989931

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你的片子是什么切的，冰冻还是石蜡？
你做的组化是什么水平的，细胞还是分子水平的？
第一，我看到你的第一张片子，上面有很多碎点点，如果你是石蜡切片，那么这些东西很可能是石蜡碎屑和组织切片的残渣。也就是说，你的切片在预处理时没有清洗干净（比如脱蜡）。
第二，如果你是做组织水平的染色，那么我看到的你的片子完全呈现均一的棕色，那么你的观察目的是什么？如果你是做的IELISA，那么图片里所有的组织均呈现同一种颜色，那么一种可能是你的实验时失败的，棕色只是非特异性结合产生的背景色，二种可能是你成功了，但是这样得到的结论是待测物在组织中广泛存在，可是。。。以我个人看来，第二种可能性不大。
第三，我看到了你最后一张片子，你使用的组织，标准情况下的切片是这个样子的么？是不是碎了?
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9楼2013-12-17 16:25:12
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kinsch

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
~~~~(>_<~~~~ ，情况跟LZ一样...有解决到么？
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10楼2013-12-19 22:31:02
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