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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 资料求助 » 依利特C18色谱柱问题
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求高手指点

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by tuange at 2013-11-21 10:21:38
样品用水溶解没问题
你时刚开始做液相吧，以后有问题相互学习探讨？换流动相前不能用甲醇，要用水、5%~30%甲醇水都问题不大，记住：可以用纯水，没问题的！！！！！
流动相为什么分开抽滤？？混合后可能会有盐析 ...

额。。。。。。。那个液相仪器就是要求甲醇和盐分开放的，它可以按但一定比例流，，，那我最好是先混合再抽滤超声是吧
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11楼2013-11-21 15:42:14
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求高手指点

金虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by tuange at 2013-11-21 10:25:27
甲醇和缓冲盐混合溶液产生气泡也会析出盐，最后混合后过滤。
再有，缓冲盐比例较高，所以换流动相前柱子里面不能使甲醇，最好用水。
每个色谱条件都是不一样的...

要是盐析出的话  我用10%甲醇洗的话应该可以恢复正常啊，，，，洗了很久都没恢复
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12楼2013-11-21 15:46:12
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求高手指点

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by tuange at 2013-11-21 10:21:38
样品用水溶解没问题
你时刚开始做液相吧，以后有问题相互学习探讨？换流动相前不能用甲醇，要用水、5%~30%甲醇水都问题不大，记住：可以用纯水，没问题的！！！！！
流动相为什么分开抽滤？？混合后可能会有盐析 ...

而且我的盐浓度不高啊。。。。
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13楼2013-11-21 15:50:54
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tuange

木虫 (著名写手)

第三军团首席执行官
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11楼: Originally posted by 求高手指点 at 2013-11-21 15:42:14
额。。。。。。。那个液相仪器就是要求甲醇和盐分开放的，它可以按但一定比例流，，，那我最好是先混合再抽滤超声是吧...

没有仪器没这种要求，不是说几个通道你就必须都利用起来
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人寿百年尔，谁得死其所。有生当醉饮，借月照华庭。
14楼2013-11-21 16:09:12
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tuange

木虫 (著名写手)

第三军团首席执行官
引用回帖:
11楼: Originally posted by 求高手指点 at 2013-11-21 15:42:14
额。。。。。。。那个液相仪器就是要求甲醇和盐分开放的，它可以按但一定比例流，，，那我最好是先混合再抽滤超声是吧...

刚才打错了，没有仪器有这种要求
用纯水冲，或许你柱子还有救，不过依利特柱子也便宜，一千多块，买根新的下次注意就好了，浪费时间和仪器去处理柱子不值当的
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人寿百年尔，谁得死其所。有生当醉饮，借月照华庭。
15楼2013-11-21 16:12:36
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求高手指点

金虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by tuange at 2013-11-21 16:09:12
没有仪器没这种要求，不是说几个通道你就必须都利用起来...

好的啊。。。那我下次试试先混合，看看有没有柱压继续上升的情况
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16楼2013-11-22 08:42:50
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金虫 (小有名气)
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15楼: Originally posted by tuange at 2013-11-21 16:12:36
刚才打错了，没有仪器有这种要求
用纯水冲，或许你柱子还有救，不过依利特柱子也便宜，一千多块，买根新的下次注意就好了，浪费时间和仪器去处理柱子不值当的...

反向C18可以用纯水冲吗？  最后要有点有机相的吧，，，，不是我不想买啊，买仪器的老师必须要我找到原因，否则不让买。         柱压虽然高了，但是我样品还是可以分析，下次我注意流动相试试。。。希望可以吧，，，，
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17楼2013-11-22 08:45:02
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星海慧儿

荣誉版主 (职业作家)

木虫精灵

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
盐的比例比较高，样品的成分比较复杂。我想这种情况应该是柱头筛板污染了。你可以正着用倒着冲，冲的时候水相比例大些（95%或90%），严重时可以把柱头拆开，把筛板超声去污一下，这样对压力和峰型会有改善的，不过拆的时候要小心，尽量减少对填料的破坏。
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我是超级天后：天天努力，不落人后！
18楼2013-11-22 11:22:06
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ririwowo

禁虫 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
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19楼2013-11-22 13:21:50
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求高手指点

金虫 (小有名气)
引用回帖:
18楼: Originally posted by 星海慧儿 at 2013-11-22 11:22:06
盐的比例比较高，样品的成分比较复杂。我想这种情况应该是柱头筛板污染了。你可以正着用倒着冲，冲的时候水相比例大些（95%或90%），严重时可以把柱头拆开，把筛板超声去污一下，这样对压力和峰型会有改善的，不过拆 ...

筛板果断拆不来啊。。。。我看柱子都一根连着的，还可以拆出来吗
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20楼2013-11-25 13:43:45
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