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小葵Beryl

新虫 (小有名气)

[求助] 请大家帮忙看下银纳米簇在不同激发波长下的发射峰,请问是荧光峰吗?

请各位大虾帮忙,小女子万分感谢:

本人使用DNA分子作为配体合成的银纳米簇,用磷酸缓冲溶液作为介质,pH=6.6 ,并用荧光光谱做了表征,结果发现,随着激发光谱波长的红移,发射光谱峰位也跟着红移,且幅度不小,且最大值先增大后减小,550nm所对应的的峰值最大,如附件中的图形所示,上周开组会导师说有可能是散射峰,而不是荧光,请大家帮忙鉴定一下,是荧光还是散射?应该怎样确定呢?


请大家帮忙看下银纳米簇在不同激发波长下的发射峰,请问是荧光峰吗?
FL-EX(nm).jpg

[ Last edited by supernatural on 2013-11-19 at 22:16 ]
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benpaopinle

金虫 (小有名气)

引用回帖:
29楼: Originally posted by 小葵Beryl at 2014-01-17 19:21:18
我觉得可能与碱基序列有关吧,你多查阅一下文献,看采用你所用的DNA作为配体实在什么条件下合成的。多试几次,就能合成出来了...

我也是查过好多篇文献综合了一下合成方法,至于DNA序列,不完全与文献相同,也是非常害怕DNA出问题啊!我把我的合成方法给你看看,还请前辈抽空指正啊!!!尝试了10多次没合成出来,也没人指导,因为就要放假了,所以心里也比较急!真心希望前辈指导!
下面是我综合多篇文献后的合成方法,反应体系是在1mL离心管中进行的:将DNA在90℃水浴中保持10min,慢慢冷却,取100ul 10uM DNA于PB(20mM,pH=7.4)中,然后加入10ul 600uM的AgNO3溶液,剧烈摇晃1min,孵育15min(室温避光和4℃避光都试了),之后向其中加入新配制的10ul 600uM的NaBH4溶液,剧烈摇晃1min,然后在4℃下避光反应4h(室温和反应过夜也试了)。反应体系的最终浓度:DNA-1uM,AgNO3-6uM,NaBH4-6uM;最终摩尔比为:DNA: Ag+:NaBH4=1:6:6;DNA序列 CCC CCC CCC CCC TTT TTC GTT TCC。
在上述合成方法上请允我附上几个问题:
1.DNA序列是否有问题;
2.Ag+与DNA的反应条件:时间长短如何影响,温度和光照如何控制;
3.NaBH4溶液的的配制(我是在冰水浴中),怎么样保证不会失效;
4.反应时间和温度以及光照条件如何设置;
5.反应的摩尔比对合成有什么影响。
如果可以的话,前辈能否将合适的DNA序列给我借鉴一下!我看文献好多荧光强度都不是很强,与DNA序列也有很大关系!因为时间关系,现在又要放假了,所以心里比较急!望前辈能悉心指导!不胜感激!!!!
30楼2014-01-18 15:51:23
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yetaieva

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小葵Beryl: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-11-20 09:10:19
是荧光峰,银簇的发射峰不一定 有个最佳激发的
2楼2013-11-18 21:01:25
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sally208

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小葵Beryl: 金币+4, ★★★★★最佳答案 2013-11-20 09:10:42
要想排除是不是散射峰,可以测一个相同仪器设置下,所用溶剂对应的谱图,对比一下就知道了。
同时,建议测一个激发谱。
3楼2013-11-19 04:38:45
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小葵Beryl

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yetaieva at 2013-11-18 21:01:25
是荧光峰,银簇的发射峰不一定 有个最佳激发的

正常情况下,发射波长应该不随激发波长的移动而移动啊,只是强度有强有弱,是不是您曾合成过,也有类似的现象呢  谢谢
做个向日葵样的女子,向着阳光生活
4楼2013-11-19 08:45:53
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