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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 碳酸酐酶催化p-NPA水解酶活测定法讨论
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李哈

木虫 (初入文坛)

[求助] 碳酸酐酶催化p-NPA水解酶活测定法讨论 已有1人参与

最近在做碳酸酐酶催化二氧化碳水解的实验，需要将该酶固定到载体材料上，并测其酶活回收率，在做对碳酸酐酶的酶活进行测定时，用p-NPA水解法测酶活经常出现空白吸光度值比加酶后吸光度值还大的情况，有大侠做过这方面研究的，能否给小弟指点指点应该怎样做才好？或者对P-NPA和酶的特性比较熟悉的也行，大家一起交流一下。
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1楼 2013-11-15 17:09:19
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叠瓣重华

木虫 (小有名气)
这方面的实验我有做过，你的空白是怎么配的，我没出现过你这种情况啊
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2楼2014-03-03 14:08:23
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李哈

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 叠瓣重华 at 2014-03-03 14:08:23
这方面的实验我有做过，你的空白是怎么配的，我没出现过你这种情况啊

空白就是不加酶，其它操作相同，让p-npa自然反应，然后测一段时间后的吸光度值。您能跟我分享一下您测酶活时的操作方法吗？可以发我邮箱shixuexiaowu@126.com ，非常感谢您的回复！
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3楼2014-03-15 09:11:58
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KO奋斗

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 李哈 at 2014-03-15 09:11:58
空白就是不加酶，其它操作相同，让p-npa自然反应，然后测一段时间后的吸光度值。您能跟我分享一下您测酶活时的操作方法吗？可以发我邮箱shixuexiaowu@126.com ，非常感谢您的回复！...

请问你的问题解决了吗？我也碰到这样的问题

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4楼2014-08-15 07:04:56
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李哈

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by KO奋斗 at 2014-08-15 07:04:56
请问你的问题解决了吗？我也碰到这样的问题
...

没有
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5楼2014-09-16 20:30:09
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1527449899

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 叠瓣重华 at 2014-03-03 14:08:23
这方面的实验我有做过，你的空白是怎么配的，我没出现过你这种情况啊

大侠请问一下碳酸酐酶的活性你是怎么根据吸光度值计算的，拜托告知一下
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6楼2015-07-09 21:44:23
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1527449899

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

您好，我也没有出现过这种情况。不过您可以告诉我您如何根据吸光光度值计算碳酸酐酶活性的吗？拜托
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7楼2015-07-09 21:46:39
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