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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药理学 » 血浆蛋白结合，加入甲醇稀释峰面积却比原液的高，求解！
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704361326

金虫 (正式写手)

恩恩

[求助] 血浆蛋白结合，加入甲醇稀释峰面积却比原液的高，求解！

我现在在测血浆蛋白结合，化合物溶解度不好，所以超滤法和平衡透析法都在做。但遇到一个很奇怪的现象：
平衡透析时：加入PBS离心后，取上清，1，直接进样；2，稀释4倍进样。
但峰下面积1比2还要低。奇怪！
用0.22滤膜过滤，or 离心两次的方法都试过了，还是这样！
求高手帮忙解答！
谢谢！
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踏踏实实地走好自己的路
1楼 2013-11-15 11:10:18
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wsh14

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 谢谢交流 2013-11-16 12:50:51
是不是还是有蛋白结合的药物啊，加甲醇后蛋白被破坏变性，药物释放出来，所以浓度变大!!!!!!!!!!!!
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2楼2013-11-15 14:59:55
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704361326

金虫 (正式写手)

恩恩
可是我们已经离心了啊，
过滤的结果也一样，再加上做质谱验证，发现就是它的响应值比没有稀释的响应值高。
迷茫啊。。。。
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踏踏实实地走好自己的路
3楼2013-11-16 09:28:05
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704361326

金虫 (正式写手)

恩恩
引用回帖:
2楼: Originally posted by wsh14 at 2013-11-15 14:59:55
是不是还是有蛋白结合的药物啊，加甲醇后蛋白被破坏变性，药物释放出来，所以浓度变大!!!!!!!!!!!!

我们专门做了没有加入血浆的样品，可是结果还是如此啊
会不会是药物有什么不知道的性质？可以向神马方向考虑？
再加上做质谱验证，发现就是它的响应值比没有稀释的响应值高。

就求解！
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踏踏实实地走好自己的路
4楼2013-11-19 09:11:09
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wsh14

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
704361326(豆哥代发): 金币+10, 谢谢 2016-12-07 09:03:41
引用回帖:
4楼: Originally posted by 704361326 at 2013-11-19 09:11:09
我们专门做了没有加入血浆的样品，可是结果还是如此啊
会不会是药物有什么不知道的性质？可以向神马方向考虑？
再加上做质谱验证，发现就是它的响应值比没有稀释的响应值高。

就求解！...

是不是溶解度的问题啊？在甲醇中溶解度较大，溶解得多，因此响应值大。没有稀释的样品是用什么溶剂的啊？如果还是甲醇那这个说法就解释不通了。如果不是甲醇，则把它吹干，再用甲醇溶解测一下。
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5楼2013-11-19 12:15:11
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