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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » Superdex 200 凝胶柱上样
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小李爱学习

银虫 (正式写手)

[求助] Superdex 200 凝胶柱上样

我要用凝胶柱做蛋白纯化！
我用国产的泵装了Superdex 200 凝胶柱，内径1.6 cm 长度70 cm的玻璃柱。
第一步用1ml/min装了5小时，取下装柱器后，第二步用3ml/min的流速装了1小时，柱子应该压实了。然后把柱调节器调节到柱床上面5mm处。
由于条件有限，没有进样阀，想请教一下上样的时候该怎么做。
实验室以前的师兄说可以把填料上方的缓冲液流到填料上方一点点，然后加样，等到样液进入填料后，加入缓冲液填满柱子，然后把柱子连接好，进行纯化。
这样可以吗？想请教大家还有什么好的方法没有，谢谢了！
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1楼 2013-11-14 21:36:22
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同东中郎将

新虫 (小有名气)
没有进样阀的时候，我们一般用Buffer泵也可以进样品。
把柱调节器调节到柱床上面5mm处。我们一般都压到胶面位置。
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曾子曰：“士不可以不弘毅，任重而道远。仁以为己任，不亦重乎？死而后已，不亦远乎？”
2楼2013-11-15 14:41:05
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小李爱学习

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 同东中郎将 at 2013-11-15 14:41:05
没有进样阀的时候，我们一般用Buffer泵也可以进样品。
把柱调节器调节到柱床上面5mm处。我们一般都压到胶面位置。

每次进样一般只有2ml，用buffer泵不太合适
不过还是谢谢您
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3楼2013-11-16 18:04:16
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