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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 如何用紫外分光光度计来确定细菌的浓度？怎么做标准曲线？
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人痴我狂

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dllchina at 2013-11-14 17:12:07
微生物OD值是反映菌体生长状态的一个指标，OD是optical delnsity（光密度）的缩写，表示被检测物吸收掉的光密度。通常400～700nm 都是微生物测定的范围，需要紫外分光光度计测最大吸收波长。你是什么菌种？用得最多 ...

你好！我现在在做紫外测量生长曲线的实验。所以想向你请教一下。
测量细菌OD值，是离心后沉淀重悬，还是直接吹打混匀后测量？
另外，空白对照是只需要一个，还是每一个都离心后用上清对空白对照？
谢谢！
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难得癫狂~~~
11楼2014-08-04 09:29:49
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dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神
引用回帖:
11楼: Originally posted by 人痴我狂 at 2014-08-04 09:29:49
你好！我现在在做紫外测量生长曲线的实验。所以想向你请教一下。
测量细菌OD值，是离心后沉淀重悬，还是直接吹打混匀后测量？
另外，空白对照是只需要一个，还是每一个都离心后用上清对空白对照？
谢谢！...

一般是混匀就可以测量了，不同的样品需要不同的空白对照，这个根据自己试验情况而定
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12楼2014-08-04 10:55:35
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人痴我狂

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by dllchina at 2014-08-04 10:55:35
一般是混匀就可以测量了，不同的样品需要不同的空白对照，这个根据自己试验情况而定...

我还想请教一下：做空白对照时，只要同一次，和以后所有的实验都用一种溶液（比如未接种培养基）做空白对照就行了，对吧？
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难得癫狂~~~
13楼2014-08-06 19:19:23
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dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神
引用回帖:
13楼: Originally posted by 人痴我狂 at 2014-08-06 19:19:23
我还想请教一下：做空白对照时，只要同一次，和以后所有的实验都用一种溶液（比如未接种培养基）做空白对照就行了，对吧？...

恩，是可行的
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14楼2014-08-06 22:48:35
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彭朝霞

银虫 (小有名气)
我不是微生物的，但是我使用紫外分光光度计，UV-2802型的。
做标准曲线的话，需要大概5个浓度。配好后，点标准曲线，放入含有超纯水的比色皿，单击OA，输入5个浓度，双击目标吸光度，重复。最后保存结果。
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15楼2015-03-12 20:34:21
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冰夕阳0508

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by eagles123 at 2013-11-14 21:14:07
那就要看抑菌剂的效果了。OD的灵敏度很低。如果我记得不错 10*6 CFU/ml 浓度OD都测不出来。 所以如果你抑菌剂比较强你得到的结果就可能是一条平线，但实际上可能是在死或者长得很慢，长到很低的水平就不长了，这些都 ...

万能的虫友   我用620nm测细菌的OD值,可是现在加了有颜色的化合物，是否会对结果有影响，现在是否要改变检测波长？万分感谢。
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16楼2016-07-05 14:25:22
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dllchina at 2013-11-14 17:12:07
微生物OD值是反映菌体生长状态的一个指标，OD是optical delnsity（光密度）的缩写，表示被检测物吸收掉的光密度。通常400～700nm 都是微生物测定的范围，需要紫外分光光度计测最大吸收波长。你是什么菌种？用得最多 ...

学习了

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17楼2016-07-05 23:19:33
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18186117370

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 彭朝霞 at 2015-03-12 20:34:21
我不是微生物的，但是我使用紫外分光光度计，UV-2802型的。
做标准曲线的话，需要大概5个浓度。配好后，点标准曲线，放入含有超纯水的比色皿，单击OA，输入5个浓度，双击目标吸光度，重复。最后保存结果。

为嘛我导师跟我说标准曲线要7到9个点呢？

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18楼2017-03-29 09:52:26
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