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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 请教反相C18如何冲洗
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简单unique

金虫 (正式写手)

[交流] 请教反相C18如何冲洗

我用的是Kromasil 的C18柱，流动相有百分之十的0.6%的磷酸，仪器是双泵的，前几天，将两个泵分别脱完气以后，就忘了调比例，结果平衡系统用得全是那0.6%的磷酸，0.3的流速，走了有足足三个小时才发现，后来重新平衡好了以后，峰形、保留时间、分离度都没有变，但是柱压高得吓人，试过用不同比例的甲醇和水冲效果都不太好，并且一进样压力就不停往上长，进不了几针就高得不能进了，自己犯了低级错误实在不好意思说。但是实验差不了几天就结束了，不可能再换柱子。请教高手有没有高招能解决问题。将不胜感激！
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1楼 2007-12-13 15:05:40
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简单unique

金虫 (正式写手)
还有一个问题就是，流速比较低的时候（没有进样），压力很正常，一调高流速就高得不行
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2楼2007-12-13 15:07:28
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lillejuan

铜虫 (初入文坛)
可能是哪里堵了，反冲一下不知能解决问题否
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3楼2007-12-14 10:22:00
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tianruibencao

荣誉版主 (正式写手)
长时间用水和甲醇，调节比例的冲，希望早日成功。
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4楼2007-12-14 10:24:20
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lillejuan

铜虫 (初入文坛)
还有，可能是哪个泵出问题了，流速一大问题就出来了
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5楼2007-12-14 10:26:05
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yzzzxxhh

至尊木虫 (正式写手)
我们用的也是Kromasil 的C18柱.柱子可能需要再生,用水—乙腈—异丙醇—乙腈—水冲洗.效果还可以.仅供参考.
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6楼2007-12-14 14:46:32
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w999999

金虫 (小有名气)
可以用50度的热水，0.5ml/min冲一天
当然有柱温箱的话，可以直接把柱温设定为45度冲一天
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7楼2007-12-14 15:18:40
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glduan

铜虫 (初入文坛)
如果“峰形、保留时间、分离度都没有变”，那就不一定是柱子的问题吧，先不要接柱子，看看流路系统的压力正不正常，先排除这方面的问题，再考虑柱子
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8楼2007-12-14 16:02:01
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简单unique

金虫 (正式写手)

谢谢大家

昨天反冲了一下，今天再倒回来平衡好了没事，进了两针就又超压了，仪器室老师旋松柱出口后压力没有下降，好像确实是柱子的问题，其他没有检查过所以不知道，刚用以丙醇冲来着，现在刚换回甲醇，不知道会怎么样？总在想会不会柱头已经塌陷了，只是还没有很严重， 对了现在是没有接检测器直接冲的柱子。
另外6楼的能不能介绍一下用热水冲的原理？我前段时间直接进过有机溶剂（3~10碳的一取代的醇，也是犯了错误才知道很低级）
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9楼2007-12-14 18:02:33
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梅雪

★
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢您的建议！
建议楼主：先把柱子拆下来，用水大流量冲洗液相系统至少３０min，我一般用到６ml/min ,最后压力在8MPa左右，可能不同的液相全有所不同，但是方法应该是对的，相对而言也比较简单。液相上可能堵的地方太多了，比如泵头、单向阀、混合器、流通池等，也可以把上面的器件拆下来，用水超声３０min后再装上，一般也能解决系统堵塞的问题（除柱子外）。另外“旋松柱出口后压力没有下降”好像也不能说明柱子没堵，如果真是柱子堵了，那只能用水，柱温高点，长时间冲洗了，如果担心水对柱损伤，就少加点甲醇冲吧，可能不会有太好的办法。
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10楼2007-12-15 03:20:29
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