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简单unique

金虫 (正式写手)

[交流] 请教反相C18如何冲洗

我用的是Kromasil 的C18柱,流动相有百分之十的0.6%的磷酸,仪器是双泵的,前几天,将两个泵分别脱完气以后,就忘了调比例,结果平衡系统用得全是那0.6%的磷酸,0.3的流速,走了有足足三个小时才发现,后来重新平衡好了以后,峰形、保留时间、分离度都没有变,但是柱压高得吓人,试过用不同比例的甲醇和水冲效果都不太好,并且一进样压力就不停往上长,进不了几针就高得不能进了,自己犯了低级错误实在不好意思说。但是实验差不了几天就结束了,不可能再换柱子。请教高手有没有高招能解决问题。将不胜感激!
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简单unique

金虫 (正式写手)

还有一个问题就是,流速比较低的时候(没有进样),压力很正常,一调高流速就高得不行
2楼2007-12-13 15:07:28
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lillejuan

铜虫 (初入文坛)

可能是哪里堵了,反冲一下不知能解决问题否
3楼2007-12-14 10:22:00
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tianruibencao

荣誉版主 (正式写手)

长时间用水和甲醇,调节比例的冲,希望早日成功。
4楼2007-12-14 10:24:20
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lillejuan

铜虫 (初入文坛)

还有,可能是哪个泵出问题了,流速一大问题就出来了
5楼2007-12-14 10:26:05
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yzzzxxhh

至尊木虫 (正式写手)

我们用的也是Kromasil 的C18柱.柱子可能需要再生,用水—乙腈—异丙醇—乙腈—水冲洗.效果还可以.仅供参考.
6楼2007-12-14 14:46:32
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w999999

金虫 (小有名气)

可以用50度的热水,0.5ml/min冲一天
当然有柱温箱的话,可以直接把柱温设定为45度冲一天
7楼2007-12-14 15:18:40
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glduan

铜虫 (初入文坛)

如果“峰形、保留时间、分离度都没有变”,那就不一定是柱子的问题吧,先不要接柱子,看看流路系统的压力正不正常,先排除这方面的问题,再考虑柱子
8楼2007-12-14 16:02:01
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简单unique

金虫 (正式写手)

谢谢大家

昨天反冲了一下,今天再倒回来平衡好了没事,进了两针就又超压了,仪器室老师旋松柱出口后压力没有下降,好像确实是柱子的问题,其他没有检查过所以不知道,刚用以丙醇冲来着,现在刚换回甲醇,不知道会怎么样?总在想会不会柱头已经塌陷了,只是还没有很严重, 对了现在是没有接检测器直接冲的柱子。
另外6楼的能不能介绍一下用热水冲的原理?我前段时间直接进过有机溶剂(3~10碳的一取代的醇,也是犯了错误才知道很低级)
9楼2007-12-14 18:02:33
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梅雪


karl2100(金币+1,VIP+0):多谢您的建议!
建议楼主:先把柱子拆下来,用水大流量冲洗液相系统至少30min,我一般用到6ml/min ,最后压力在8MPa左右,可能不同的液相全有所不同,但是方法应该是对的,相对而言也比较简单。液相上可能堵的地方太多了,比如泵头、单向阀、混合器、流通池等,也可以把上面的器件拆下来,用水超声30min后再装上,一般也能解决系统堵塞的问题(除柱子外)。另外“旋松柱出口后压力没有下降”好像也不能说明柱子没堵,如果真是柱子堵了,那只能用水,柱温高点,长时间冲洗了,如果担心水对柱损伤,就少加点甲醇冲吧,可能不会有太好的办法。
10楼2007-12-15 03:20:29
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