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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于染色质免疫共沉淀技术不太懂得两个问题
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yghboy168

银虫 (小有名气)

[求助] 关于染色质免疫共沉淀技术不太懂得两个问题

1.染色质免疫共沉淀可以用于原核细菌吗？
2。用于沉淀的特异性抗体如何获得？
希望有经验的同仁指教！
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眼内有尘三界窄，心头无事一床宽！
1楼 2013-11-05 09:13:48
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c_jade

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 胡乱走走2011 at 2014-03-29 10:40:19
我知道可以外源表达后加标签，但是据我的理解，细胞超声后，得到蛋白质和DNA复合体，然后用该蛋白质的特异性抗体，得到抗体-蛋白-DNA复合物，我不知道蛋白外源表达加上相应标签后，如何还能得到该靶蛋白-DNA？最近 ...

构建质粒，转染细胞表达。然后就可以用标签抗体沉淀蛋白DNA复合物了
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11楼2014-03-31 11:20:03
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woai43

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-05 11:57:19
1、染色质免疫共沉淀实验是用于检测某一蛋白与DNA的结合情况，从原理上讲是可以检测原核细菌的。问题是是否存在针对你感兴趣原核细菌蛋白的抗体？
2、针对细菌蛋白的抗体市面上不多吧，可以尝试自己制备。将感兴趣的细菌蛋白进行分子克隆并纯化蛋白，再免疫兔子或者小鼠。现在有很多公司提供定制抗体服务，你可以咨询一下。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2013-11-05 09:27:27
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沙门小rna

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-06 16:46:40
1可以的。我们在做。
2你可以在细菌蛋白上加个标签。用标签抗体做这个实验，不用制备特定单抗。明白？
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

yghboy168
应助之星就是我~没错。你没有看错~
3楼2013-11-05 12:40:29
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yghboy168

银虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 沙门小rna at 2013-11-05 12:40:29
1可以的。我们在做。
2你可以在细菌蛋白上加个标签。用标签抗体做这个实验，不用制备特定单抗。明白？

太感谢了，以后还要您多多指教！
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

yghboy168
眼内有尘三界窄，心头无事一床宽！
4楼2013-11-06 16:40:08
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