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在做枯草168的虫子们帮忙看看啊 !!遇到一个污染的大问题
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kehuang611
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在做枯草168的虫子们帮忙看看啊 !!遇到一个污染的大问题
我最近做枯草168的整合表达的时候,在用spc(壮观霉素)来筛选整合子时总是长出一些发生整合的杂菌,为什么我判断是杂菌呢?因为菌落形态,颜色上与168划线的菌不太一致,现在我想可能我有几种方法供自己选择了,一,换载体上的抗生素抗性基因;二,找168里的特异基因(只有168中有),设计引物扩增,现在想向大家请教有没有这样的特异基因???还有就是是不是做枯草用spc时特别容易发生这种现象?反正用卡纳,氯霉素时相对比较稳定。
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1楼
2013-10-30 14:53:07
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kehuang611(金币+1): 谢谢参与
我先请教楼主枯草168的电转方法,不知可否? 本人研究的是苏云金芽胞杆菌的方向,对枯草不是很懂。
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8楼
2013-11-03 14:18:19
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kehuang611
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这灌水灌的,希望虫子们帮个忙啊
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2楼
2013-10-30 14:56:16
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liygmail
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kehuang611(金币+1): 谢谢参与
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助!
2013-11-03 18:34:39
枯草168是色氨酸缺陷型,可以从这方面考虑试试
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4楼
2013-10-31 00:16:33
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kehuang611
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4楼
:
Originally posted by
liygmail
at 2013-10-31 00:16:33
枯草168是色氨酸缺陷型,可以从这方面考虑试试
这个我也想到了,但是具体到缺陷的基因序列?168我记得是诱导突变来的,还有假使不考虑基因的话,好像168能在M9培养基上长啊即不加色氨酸也可以生长啊,所以我当时也就否掉了这个,我想问问大家168中是否有其特殊的基因,最好有详细的出处,有序列当然最好了。
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5楼
2013-10-31 10:09:48
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dllchina
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kehuang611(金币+1): 谢谢参与
m9是纯合成培养基么,如果里面还有天然成分,那就不好排除了
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6楼
2013-10-31 23:11:02
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hathryn
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2014-03-09 14:41:35
我们一般都用SPC做筛选标记,没有出现过楼主说的情况,一般长杂菌我都会把出发菌株划线分纯一下,然后再用需要使用的抗生素做一下表型验证,对点什么的都可以
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9楼
2014-03-07 20:53:06
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kehuang611(金币+1): 谢谢参与
做枯草168的大神们,知道它是否有抗生素抗性基因?为什么文献都找不到,求救
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11楼
2014-03-10 11:18:32
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QqSsAaRr
铁虫
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
亲,你研究枯草168的抗生素抗性基因吗
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12楼
2014-03-10 11:21:53
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周菁菁920722
3楼
2013-10-30 17:30
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neu234
7楼
2013-11-01 19:47
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姬如千瀧
10楼
2014-03-08 22:32
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kehuang611(金币+1): 谢谢参与
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