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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 在做枯草168的虫子们帮忙看看啊 ！！遇到一个污染的大问题
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kehuang611

新虫 (小有名气)

[交流] 在做枯草168的虫子们帮忙看看啊 ！！遇到一个污染的大问题

我最近做枯草168的整合表达的时候，在用spc（壮观霉素）来筛选整合子时总是长出一些发生整合的杂菌，为什么我判断是杂菌呢？因为菌落形态，颜色上与168划线的菌不太一致，现在我想可能我有几种方法供自己选择了，一，换载体上的抗生素抗性基因；二，找168里的特异基因（只有168中有），设计引物扩增，现在想向大家请教有没有这样的特异基因？？？还有就是是不是做枯草用spc时特别容易发生这种现象？反正用卡纳，氯霉素时相对比较稳定。
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1楼 2013-10-30 14:53:07
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

fangfang_

铜虫 (初入文坛)
★
kehuang611(金币+1): 谢谢参与
我先请教楼主枯草168的电转方法，不知可否? 本人研究的是苏云金芽胞杆菌的方向，对枯草不是很懂。
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8楼2013-11-03 14:18:19
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kehuang611

新虫 (小有名气)
这灌水灌的，希望虫子们帮个忙啊
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2楼2013-10-30 14:56:16
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liygmail

至尊木虫 (职业作家)
★ ★
kehuang611(金币+1): 谢谢参与
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助！ 2013-11-03 18:34:39
枯草168是色氨酸缺陷型，可以从这方面考虑试试
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4楼2013-10-31 00:16:33
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kehuang611

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by liygmail at 2013-10-31 00:16:33
枯草168是色氨酸缺陷型，可以从这方面考虑试试

这个我也想到了，但是具体到缺陷的基因序列？168我记得是诱导突变来的，还有假使不考虑基因的话，好像168能在M9培养基上长啊即不加色氨酸也可以生长啊，所以我当时也就否掉了这个，我想问问大家168中是否有其特殊的基因，最好有详细的出处，有序列当然最好了。
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5楼2013-10-31 10:09:48
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dllchina

木虫 (著名写手)
★
kehuang611(金币+1): 谢谢参与
m9是纯合成培养基么，如果里面还有天然成分，那就不好排除了

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6楼2013-10-31 23:11:02
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hathryn

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★
kehuang611(金币+1): 谢谢参与
dllchina: 金币+3, good 2014-03-09 14:41:35
我们一般都用SPC做筛选标记，没有出现过楼主说的情况，一般长杂菌我都会把出发菌株划线分纯一下，然后再用需要使用的抗生素做一下表型验证，对点什么的都可以
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9楼2014-03-07 20:53:06
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QqSsAaRr

铁虫 (初入文坛)
★
kehuang611(金币+1): 谢谢参与
做枯草168的大神们，知道它是否有抗生素抗性基因？为什么文献都找不到，求救
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11楼2014-03-10 11:18:32
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QqSsAaRr

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
亲，你研究枯草168的抗生素抗性基因吗
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12楼2014-03-10 11:21:53
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周菁菁9207223楼
2013-10-30 17:30   回复  
kehuang611(金币+1): 谢谢参与
neu2347楼
2013-11-01 19:47   回复  
kehuang611(金币+1): 谢谢参与
姬如千瀧10楼
2014-03-08 22:32   回复  
kehuang611(金币+1): 谢谢参与
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