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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » ＰＨ计和乙腈
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huaruishi

新虫 (著名写手)

[求助] ＰＨ计和乙腈

4月份摸了个HPLC条件，乙腈用的是默克的，PH计是理达，一直挺好的。后来在一次测定中突然开始分离度变差了，但稍调一下流动相比例就可以恢复。现在再用，乙腈用天地的，PH计是赛多利斯的，发现PH值、流动相比例都得调整。悲催的是以前的流动相中乙腈70%-85%都行的，现在只有79%一个点可以了，78%不行，80%也不行。整个中实验中用的是同一根柱子，同一台液相。请教各位大侠：理达PH计校正时温度是25℃，赛多利斯自动温差补偿的，二者所测定PH值会有差别吗？默克乙腈和天地乙腈对色谱峰分离的影响有差别吗？
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1楼 2013-10-30 09:31:01
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akosrios

铁杆木虫 (知名作家)
引用回帖:
7楼: Originally posted by huaruishi at 2013-10-31 09:40:50
我仔细想了这几个月的情景，怀疑是柱子问题。我用的水相是磷酸溶液，浓氨水调节PH。就是最佳比例从开始的73%乙腈，后来是75%，现在又到了79%，很有规律的样子。是不是柱子问题呢？我用的是SCX柱，现在峰还是尖的， ...

不知道ph是多少，可以通过磷酸的不同铵盐，按照质量配比配制，这样不会出现ph计，温度等影响？

另外如此高的乙腈比例，注意可能会导致盐的析出。

是否是柱子问题，可以采用色谱柱的说明书上的，柱效评价方法评估一下。
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中华人民共和国公民有言论、出版、集会、结社、游行、示威的自由。---中国人民共和国宪法二章三十五条
8楼2013-10-31 10:13:46
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鸭绿江畔

铁杆木虫 (著名写手)

牛B

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
huaruishi: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-10-30 15:14:16
release53: 金币+1, 辛苦了 2013-10-31 15:34:42
我个人认为，问题就出在乙腈和酸上。其实调pH就是为了改善峰型，亦或者是解决出不出峰的问题。
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我那么努力，就是为了在更高的层次遇见你！
2楼2013-10-30 09:41:51
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suruiqin

版主 (知名作家)
这个只能说明你的条件耐用性不好，有待改进
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所有的成就都源于新的挑战
3楼2013-10-30 14:07:59
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akosrios

铁杆木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
suruiqin: 金币+1, 辛苦了 2013-10-30 14:11:31
huaruishi: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-10-30 15:15:34
huaruishi: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-10-30 15:48:04
天地和默克试剂都是很不错的，不至于会有这么大区别。

问题可能出在pH上，从楼主描述上看，该色谱条件耐用性较差，是否考虑优化一下

另外流动相的ph是否考虑用一些缓冲。
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huaruishi
中华人民共和国公民有言论、出版、集会、结社、游行、示威的自由。---中国人民共和国宪法二章三十五条
4楼2013-10-30 14:08:26
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