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燕知草13

新虫 (初入文坛)

[求助] 乳酸菌耐胆盐实验 胆盐为何不溶解已有1人参与

有没有人做过乳酸菌的耐胆盐实验啊?胆盐是哪个公司的,我最近做的胆盐每个梯度的灭完菌之后胆盐都不溶解,放一段时间就会析出,严重影响测OD值。0.3%-1.0%的都做了,及时不灭菌放一会儿也会沉淀。有没有人做过呀,实验半个月了毫无进展。加巯基乙酸钠和不加都试过就是不溶解。
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tyfjq

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

胆盐水解酶活性怎么做呀?用了定性的方法,{在MRS 肉汤培养基中加入0.37g/L 的CaCl2、0.3%的牛胆汁盐和2%的琼脂作平板,以不加CaCl2 的作对照,用直径1cm 的滤纸片浸透菌液后小心贴在平板培养基上,37℃厌氧培养72h 后,根据菌圈的大小挑取合适的菌株。},但并未出现想要的结果。
7楼2015-11-16 10:49:44
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alimar

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
亲 调过MRS培养基的pH没有啊 这个比较重要 会影响其溶解程度 胆盐在弱碱条件下 应该是可以溶的
pH稍微调高试试
2楼2013-10-31 14:39:30
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燕知草13

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by alimar at 2013-10-31 14:39:30
亲 调过MRS培养基的pH没有啊 这个比较重要 会影响其溶解程度 胆盐在弱碱条件下 应该是可以溶的
pH稍微调高试试

亲,这个培养基本来就是偏酸性的,适合乳酸菌的生长,那要调了PH值这个菌会不会长得好?还有即使一开始是碱性的,那么菌长出来有乳酸就变成酸性的啦,这时候胆盐会再出来吗?还会影响OD值得测量
3楼2013-11-05 11:42:29
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mayuxiao

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我刚刚做完这个,觉得测OD很不准,因为分光光度计读数一直跳,所以准备改为三小时、六小时的致死率,用平板计数法来测定。
4楼2013-11-25 21:44:16
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