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小小笨笨虎

木虫 (正式写手)

[求助] 细胞实验,求高手指点用什么溶解棕榈酸?

棕榈酸用DMSO溶解的不是太好,加的量大又可能影响细胞生长,请大家指点,用什么溶解较好,又不影响细胞生长,万分感谢!
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4楼2022-02-11 16:21:20
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yanshuai511

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+5, 鼓励交流经验! 2013-10-29 01:32:01
小小笨笨虎: 金币+10, ★★★很有帮助, 非常感谢 2013-10-30 09:19:08
我使用棕榈酸处理的肝原代细胞,棕榈酸浓储液是200mM,用无水乙醇溶解。处理细胞使用的5%的不含脂肪酸的BSA稀释的浓储液(1:9),要在55度水浴锅里溶解,然后再过滤分装,防止反复冻融。
2楼2013-10-28 22:52:17
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Ewallcage

新虫 (初入文坛)

2型糖尿病是一种以糖脂代谢异常为主要表现的慢性代谢性疾病。在体外研究中,为了模拟2型糖尿病所致的器官损伤,除在细胞培养基中添加高浓度的葡萄糖外,通常需要添加高浓度的软脂酸(棕榈酸,Palmitic acid)或软脂酸钠(棕榈酸钠,Sodium palmitate)。然而,现有配制方法不当,市场上也无可直接使用的软脂酸或软脂酸钠细胞添加剂,导致很多从事2型糖尿病的科研工作者无法顺利开展体外细胞实验。

现有技术中,有人采用甲醇、乙醇、氢氧化钠溶液等溶剂配制软脂酸或软脂酸钠,其缺点是这些溶剂本身对细胞就有毒性,而且这些溶剂是否影响软脂酸或软脂酸钠本身的性质也不清楚。也有有人利用牛血清白蛋白(BSA)可与软脂酸、或软脂酸钠结合的特点,采用高浓度的BSA溶液配制软脂酸、或软脂酸钠。上述方法的优点是溶剂本身对细胞无毒性,但仍存在以下问题:1.对BSA未进行甄选,导致其结合力不足;2.未掌握溶解软脂酸或软脂酸钠的合适条件,不能充分溶解软脂酸或软脂酸钠;3.配制的BSA-软脂酸、或BSA-软脂酸钠溶液很快有固体析出,不能有效发挥脂毒性。

我们的团队经过整整一年的研究和努力,发明了一种无溶剂毒性、无固体析出、可长期保存的软脂酸/软脂酸钠高脂细胞添加剂,并在细胞实验中成功验证和推广(Diabetes, 2017; Basci Res Cardiol, 2013),目前已与多个实验室确定了长期合作关系。
3楼2018-02-09 15:56:56
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