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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 农杆菌转拟南芥突变体关于T1种子在筛选培养基比例问题
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奔跑的乌拉龟

铜虫 (正式写手)

[求助] 农杆菌转拟南芥突变体关于T1种子在筛选培养基比例问题

用农杆菌侵染拟南芥突变体得到T0代后收获T1代的种子，在潮霉素1/2MS培养基上筛选TI代幼苗，请问是不是有真叶的和没有真叶的比例为3：1？大于这个比例可不可以？是不是不能小于这个比例？
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脚踏实地
1楼 2013-10-26 14:33:19
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湘奇一竹

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 奔跑的乌拉龟 at 2013-10-30 19:08:39
对，我就是为了筛选纯合体...

想问下，看T2代是否符合3比1分离比的时候，种子数量铺多少比较合适，太少的话，应该达不到这个分离比吧？
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6楼2018-07-08 15:35:38
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eulota

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-10-29 09:54:04
奔跑的乌拉龟: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-10-30 09:33:37
首先要明白：
T0:用来做侵染的植株
T1：T0代植株结的种子（受到侵染的胚成长而来的种子）
T2: T1代的植株（T1代种子发育而来）得到的种子（及其将来发育成的植株）

所以，T1代是随机受到侵染的种子（植株），是没有任何遗传规律的，阳性苗的多少取决于侵染的效率。而T2代其实是T1代的下一代，由于阳性T1代往往是杂合的，所以T2代才会呈现3:1的情况（有没有真叶）。
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2楼2013-10-29 09:44:33
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奔跑的乌拉龟

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by eulota at 2013-10-29 09:44:33
首先要明白：
T0:用来做侵染的植株
T1：T0代植株结的种子（受到侵染的胚成长而来的种子）
T2: T1代的植株（T1代种子发育而来）得到的种子（及其将来发育成的植株）

所以，T1代是随机受到侵染的种子（植株）， ...

嗯，谢谢你的回复，看来我还是弄混的一些概念。我现在得到的是T2代幼苗，是不是在筛选板上要严格按照3：1的比例来移植有真叶的幼苗？
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脚踏实地
3楼2013-10-30 09:33:28
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eulota

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-10-30 22:31:50
引用回帖:
3楼: Originally posted by 奔跑的乌拉龟 at 2013-10-30 09:33:28
嗯，谢谢你的回复，看来我还是弄混的一些概念。我现在得到的是T2代幼苗，是不是在筛选板上要严格按照3：1的比例来移植有真叶的幼苗？...

T2代苗在抗性培养基上，理论上是3:1（没有萌发的不算），有四分之一的苗能萌发，但不能长出真叶和根。但注意，这个3:1的比例现象是你判断你上一代植株是否转基因纯合的依据，不是你移植幼苗的依据哦。

所以只需要移植正常生长的幼苗就可以了。
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4楼2013-10-30 10:03:00
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