24小时热门版块排行榜    

查看: 8986  |  回复: 14

redrover

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

11楼2016-07-10 02:23:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

不爱做实验

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

1、目前做过的是2k左右目的片段连载体,一般情况回收较好,连接比例适合基本没问题
2、连接时,一般是16℃5h甚至过夜更长的时间
3、平端连接一般就是保证回收效果及加大回收量,感觉运气成分多。
12楼2016-07-11 14:16:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liangpz

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by yuren2009 at 2014-09-08 17:06:20
我们用的克隆材料就不用加A什么的,直接TAQ酶的PCR后,回收连接,做过1.5Kb的连接,长片段较短片段转化率确实是低点儿。

求助层主!~~
直接Taq酶加A的原理是什么呢,就是又进行了PCR?那之前本来高保真酶保真性很好,结果在加A这一步不是又增加碱基突变的几率了?
因为我在做表达,用高保真酶就是为了构建的表达载体上的片段没有碱基突变,不知道层主的方法会不会增加突变风险?
13楼2016-10-21 21:04:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

兴在——

新虫 (初入文坛)

请问楼主后来怎样了?成功了吗?因为近期我也做平末端克隆~请教下
14楼2018-10-20 15:11:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

丽媛FOOD

木虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by huoyongting at 2013-10-29 16:35:22
回收是必须的,但是我觉得没必要跑胶,直接用纯化柱回收就好了,小片段挂不上柱,我做过N次了,没问题...

你好,请问加完A尾后,直接回收,用纯化柱回收,你一般选用的是什么样的纯化柱进行回收呢?
认真地对待,真诚的生活,快乐的感受。
15楼2019-01-20 20:47:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 猫di阁楼 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 279分求调剂 一志愿211 +17 chaojifeixia 2026-03-19 19/950 2026-03-23 23:26 by 呆呆师姐
[考研] 材料292调剂 +4 橘颂思美人 2026-03-23 4/200 2026-03-23 23:16 by peike
[考研] 一志愿陕师大生物学071000,298分,求调剂 +3 SYA! 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:09 by macy2011
[考研] 350求调剂 +6 weudhdk 2026-03-19 6/300 2026-03-23 15:47 by tangyuan0840221
[考研] 328求调剂 +4 LHHL66 2026-03-23 4/200 2026-03-23 14:55 by lbsjt
[考研] 0854电子信息求调剂 +3 α____ 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:28 by zhq0425
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +11 枫桥ZL 2026-03-18 13/650 2026-03-22 20:26 by edmund7
[考研] 求调剂一志愿海大,0703化学学硕304分,有大创项目,四级已过 +6 幸运哩哩 2026-03-22 10/500 2026-03-22 20:10 by edmund7
[考研] 一志愿中南化学(0703)总分337求调剂 +9 niko- 2026-03-19 10/500 2026-03-22 16:08 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +5 Zhangbod 2026-03-21 7/350 2026-03-22 13:13 by Zhangbod
[考研] 297求调剂 +11 戏精丹丹丹 2026-03-17 12/600 2026-03-21 17:47 by ColorlessPI
[考研] 296求调剂 +4 www_q 2026-03-20 4/200 2026-03-21 17:26 by 学员8dgXkO
[考研] 0805材料320求调剂 +3 深海物语 2026-03-20 3/150 2026-03-21 15:46 by 无际的草原
[考研] 材料学学硕080502 337求调剂-一志愿华中科技大学 +4 顺顺顺mr 2026-03-18 5/250 2026-03-21 10:22 by luoyongfeng
[考研] 求调剂 +6 Mqqqqqq 2026-03-19 6/300 2026-03-21 08:04 by JourneyLucky
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +4 solanXXX 2026-03-20 4/200 2026-03-20 23:49 by alg094825
[考研] 330求调剂 +4 小材化本科 2026-03-18 4/200 2026-03-20 23:13 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕 +5 @taotao 2026-03-20 5/250 2026-03-20 20:16 by JourneyLucky
[考研] 261求B区调剂,科研经历丰富 +3 牛奶很忙 2026-03-20 4/200 2026-03-20 19:34 by JourneyLucky
[考博] 申博26年 +3 八6八68 2026-03-19 3/150 2026-03-19 19:43 by nxgogo
信息提示
请填处理意见