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sujunfeng89

金虫 (小有名气)

[求助] 各位哥哥姐姐,求教了

小弟做了大肠杆菌一个基因的荧光定量,只做了相对定量,因为想这一基因的表达是否上调,结果出来了,现在又想知道在蛋白水平上是否上调,有什么办法能够从蛋白水平检测基因表达是否上调呢?用不用上western blot?求教啊!!谢过!
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ynkuaile

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
蛋白水平检测基因表达是否上调。不能,蛋白表达高,不代表转录出的mRNA就多。mRNA多,不一定蛋白就多。两者之间不好推。蛋白可以和蛋白比。
2楼2013-10-26 10:46:22
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snowfling

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
sujunfeng89: 金币+20, ★有帮助 2013-12-13 15:30:12
这个还是做Western吧。我现在在做的这个和你类似的。mRNA水平如果有上调的话,说明转录出来的多,而mRNA用于翻译蛋白质,所以从理论水平上说应该在你取的这个时间点往后再推一点时间取样,做一个western得到蛋白水平上的变化,以此来说明这个基因是参与实际功能的。如果它只是mRNA上调而蛋白质没有变化的话,不好说明它是参与实际功能的啊。所以如果它参与功能,它在蛋白水平上就应该上调,相应的做western就应该能检测出来的。
3楼2013-11-17 20:14:48
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