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荧光显微镜
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| 我用荧光显微镜拍摄植物荧光照片,发现同一部位在低曝光值(200ms)和高曝光值(1s)时荧光的颜色有点不同,这是什么原因?哪一个才是比较准确的? |
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西瓜
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【答案】应助回帖
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感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+3, 谢谢分享经验 2013-10-25 08:47:19
bayu18: 金币+2, ★有帮助 2013-10-25 09:38:01
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wizardfan: 金币+3, 谢谢分享经验 2013-10-25 08:47:19
bayu18: 金币+2, ★有帮助 2013-10-25 09:38:01
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不同样品的荧光强度不一样,所以需要的曝光时间各不相同。合适的曝光时间,以能看清所需要的细节为宜,在此前提下曝光时间越短越好。过长的曝光时间成像容易模糊,并且容易使样品荧光淬灭。 另外,如果同时有多种荧光蛋白,过强的曝光时间可能导致其他颜色的荧光也显现出来。我自己就同时拍过带红色和绿色荧光的样品,本来滤光片用的是绿色荧光的,结果红色荧光蛋白表达太强,看绿色荧光时竟然也同时能看到红色。 楼主的图片我看是亮度的问题,不用纠结颜色,哪个更能清楚显示你要拍的部位,就选哪一个。现在大部分显微镜拍出来的其实都是黑白图像,颜色都是软件根据设置加上去的伪色,并且可以更改的,所以不要在意颜色啦。 楼主先弄清楚自己需要看的地方是哪里,然后再根据上面说的调节曝光时间就可以了。原则其实就一个:看清你需要的细节。 |
10楼2013-10-24 21:03:50
8楼2013-10-23 19:13:26
lionllp
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2楼2013-10-23 11:10:44
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4楼2013-10-23 15:36:58
lionllp
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5楼2013-10-23 15:39:20
6楼2013-10-23 15:43:05
lionllp
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7楼2013-10-23 17:15:58
daibingling
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