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dfpei

金虫 (小有名气)

[求助] 关于pEGFP-C1这个质粒

本人是学化学的,初次接触质粒这个东西,最近实验室有EGFP这个质粒,求好心的xdjm能给我讲解一下这个东西的基本性质,比如说它的含P量,是不是水溶的,因为我觉得实验室的那个质粒有股酒精的味道,还有Z80/Z60是什么意思,不惜金币不胜感激
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牧炀

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-10-22 22:57:28
pEGFP-C1是真核表达载体的一种,是空质粒。
表达绿色荧光蛋白和目的基因的融合蛋白,目的基因位于C端有否修改删除。
多克隆位点在GFP荧光蛋白基因之后,所以构建的融合蛋白,目的蛋白的N端连有GFP蛋白。
2楼2013-10-22 21:04:31
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kehan777

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-10-22 22:57:36
可以在质粒的网站上搜索该质粒的一些信息
http://www.addgene.org/vector-database/

你可以得到该质粒pEGFP-C1的大小为4700bp(碱基对),卡那霉素抗性(Kanamycin),以及一些相关多克隆位点(MCS)信息,等等。

你的Z80/Z60,我不知道是什么意思,但有OD260/280是检测核酸或蛋白质纯度的一个数值,是用蛋白质核酸测定仪测定的,其测定的原理与分光光度计一样

而你说的质粒有酒精味,这个是不是质粒保存的溶液的问题?但质粒一般是保存与灭菌水或TEbuffer中,不会有你说的酒精味。另外,质粒是溶于水的。

不知道你化学专业里具体要了解的信息是什么,而关于核酸、蛋白质等的一些生物学软件可能会帮到你,比如说功能还行,又容易上手的生物学软件DNAMAN。
关于pEGFP-C1这个质粒
QQ截图20131022213245.jpg

3楼2013-10-22 21:39:24
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dfpei

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by kehan777 at 2013-10-22 21:39:24
可以在质粒的网站上搜索该质粒的一些信息
http://www.addgene.org/vector-database/

你可以得到该质粒pEGFP-C1的大小为4700bp(碱基对),卡那霉素抗性(Kanamycin),以及一些相关多克隆位点(MCS)信息,等等。
...

弱弱的问一下,如果质粒不是保存在无菌的水,而是普通的水里会有什么后果啊?细菌病毒的会把质粒消耗了啊?
4楼2013-10-23 10:25:31
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kehan777

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

不能保存在普通的水,不然会被核酸酶消化

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
5楼2013-10-23 13:27:13
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dfpei

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by kehan777 at 2013-10-23 13:27:13
不能保存在普通的水,不然会被核酸酶消化

水里有核酸酶啊?我们直接买的质粒,我用的时候直接在实验室打开(不是无菌的环境),取出来一点,又放回冰箱,这样有问题吗?
6楼2013-10-23 15:57:16
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kehan777

木虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by dfpei at 2013-10-23 15:57:16
水里有核酸酶啊?我们直接买的质粒,我用的时候直接在实验室打开(不是无菌的环境),取出来一点,又放回冰箱,这样有问题吗?...

没问题的,操作的时候注意一下,盖子、瓶口,移液器吸取后记得换枪头,质粒于-20℃保存。
7楼2013-10-23 20:14:40
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