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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 胶体金标记试纸条 没有梯度
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395526304

铜虫 (小有名气)

[求助] 胶体金标记试纸条 没有梯度 已有2人参与

我最近在做一种农药的试纸条，可是T线有颜色，没有梯度。浓度为10ppm的标准品上样后依旧没有梯度。请问这是怎么回事？做了ELISA板的效果却很好。我优化了工作液的pH、标准品稀释液及其离子浓度、用不同溶液封闭NC膜都没有效果，请问是怎么回事？是不是还有条件我没有想到？谢谢了！
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趁年轻
1楼 2013-10-22 17:11:13
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ty10086

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我这块工作。
方便短信告知我什么项目？

T线深不深？没有梯度：1、建议降低抗体标记量2、T线抗原浓度往下降。再看看应该就有梯度了。

还有一个，用的封闭试剂纯不纯？排除非特异性吸附。如果需要高纯BSA，可以联系我们，我们在卖。希望排除封闭剂的问题。

“工作液的pH、标准品稀释液及其离子浓度、用不同溶液封闭NC膜都没有效果”这一块原因都试过了的话，参考前面说的。
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2楼2013-10-22 21:10:22
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395526304

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ty10086 at 2013-10-22 21:10:22
我这块工作。
方便短信告知我什么项目？

T线深不深？没有梯度：1、建议降低抗体标记量2、T线抗原浓度往下降。再看看应该就有梯度了。

还有一个，用的封闭试剂纯不纯？排除非特异性吸附。如果需要高纯BSA，可 ...

谢谢您的帮助。您说的两个建议我都试过 还是没有梯度。还有 我的抗体使用BSA的免疫的。在连金标时是用的BSA封闭。这个会有影响么？
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趁年轻
3楼2013-10-25 08:58:24
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ty10086

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【答案】应助回帖

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3楼: Originally posted by 395526304 at 2013-10-25 08:58:24
谢谢您的帮助。您说的两个建议我都试过 还是没有梯度。还有 我的抗体使用BSA的免疫的。在连金标时是用的BSA封闭。这个会有影响么？...

你筛选抗体也是用BSA的？
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4楼2013-10-25 21:30:30
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395526304

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ty10086 at 2013-10-25 21:30:30
你筛选抗体也是用BSA的？...

对 您遇到了什么情况？
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趁年轻
5楼2013-10-27 10:23:35
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ty10086

捐助贵宾 (小有名气)

【答案】应助回帖

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5楼: Originally posted by 395526304 at 2013-10-27 10:23:35
对 您遇到了什么情况？...

重新筛选下抗体吧
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6楼2013-10-27 17:34:04
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395526304

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by ty10086 at 2013-10-27 17:34:04
重新筛选下抗体吧...

我的抗体是用BSA的免疫原免疫出来的 请问在连金标抗体时 用BSA封闭，这个会有影响么？
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趁年轻
7楼2013-10-28 10:29:08
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ty10086

捐助贵宾 (小有名气)
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7楼: Originally posted by 395526304 at 2013-10-28 10:29:08
我的抗体是用BSA的免疫原免疫出来的 请问在连金标抗体时 用BSA封闭，这个会有影响么？...

和这个免疫原没有直接关系，和你筛选的抗原有关系。
排除掉桥抗体用bsa封闭就行。
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8楼2013-10-29 08:38:19
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zxlmy169

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
9楼2014-11-11 19:31:55
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logos3

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ty10086 at 2013-10-22 21:10:22
我这块工作。
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T线深不深？没有梯度：1、建议降低抗体标记量2、T线抗原浓度往下降。再看看应该就有梯度了。

还有一个，用的封闭试剂纯不纯？排除非特异性吸附。如果需要高纯BSA，可 ...

您好，我看您在这方面挺专业的，我也有些问题想请教您。我在做黄曲霉毒素的竞争法试纸条，材料不是胶体金，是一种复合材料。现在遇到的问题是做到10ppb再往下就不消线了，而且10ppb对应的阴性出线比较浅。探针经过ph优化后发现不加碳酸钾出线效果最好。包被原浓度高时出线清晰但是不消线，我现在做到包被原稀释70倍，10ppb才消线。稀释100倍也能出线，但是很浅，而且加了低浓度的标品不会消线，请问能否分析一下是哪里的问题呢？

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10楼2019-10-22 10:57:13
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