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请教PD10柱子的使用方法和购买途径
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最近要测一个酶活，参考文献中大多提到用PD10柱对酶提取液进行脱盐处理，还有的文献中提到用Sephadex G-50。本人没有用过这种方法，参考文献中又都是寥寥数语，让人摸不着门路，故特来贵宝地请教几个问题： 1、PD10柱子中所用的填料是不是就是Sephadex G-50？ 2、有用过的前辈，恳请提供较为详细的使用步骤说明，及注意事项，不胜感激。 3、国内在哪里可以买得到这个柱子？ |
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sayaya
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
daiti: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 非常感谢！ 2013-10-24 08:18:02
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PD-10预装脱盐柱，GE公司的产品，预装填料为Sephadex G-25。 用法很简单: 1）平衡PD-10柱，可以用纯水，也可以用适宜的缓冲液，视脱盐的目的而定。 2）上样，在柱子平衡后，将样品（1.5-2.5ml）加到柱子顶上。 3）洗脱，样品全部进入柱子内后，柱顶加入水或适宜缓冲液洗脱。（自然流速） 从加样开始计算，收集2.5~5.5ml的流出液为脱盐蛋白峰。 如果不放心，上样，洗脱，用EP管每管收集1ml，经SDS-PAGE电泳检测后，再合并样品液。 4）过柱后，充分洗涤，用20%乙醇、0.05%NaN3或0.05mol/L NaOH保存柱子。 |
4楼2013-10-23 19:11:01
