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daiti

铁虫 (小有名气)

[求助] 请教PD10柱子的使用方法和购买途径

最近要测一个酶活,参考文献中大多提到用PD10柱对酶提取液进行脱盐处理,还有的文献中提到用Sephadex G-50。本人没有用过这种方法,参考文献中又都是寥寥数语,让人摸不着门路,故特来贵宝地请教几个问题:
1、PD10柱子中所用的填料是不是就是Sephadex G-50?
2、有用过的前辈,恳请提供较为详细的使用步骤说明,及注意事项,不胜感激。
3、国内在哪里可以买得到这个柱子?
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sayaya

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
daiti: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 非常感谢! 2013-10-24 08:18:02
PD-10预装脱盐柱,GE公司的产品,预装填料为Sephadex G-25。
用法很简单:
1)平衡PD-10柱,可以用纯水,也可以用适宜的缓冲液,视脱盐的目的而定。
2)上样,在柱子平衡后,将样品(1.5-2.5ml)加到柱子顶上。
3)洗脱,样品全部进入柱子内后,柱顶加入水或适宜缓冲液洗脱。(自然流速)
从加样开始计算,收集2.5~5.5ml的流出液为脱盐蛋白峰。
如果不放心,上样,洗脱,用EP管每管收集1ml,经SDS-PAGE电泳检测后,再合并样品液。
4)过柱后,充分洗涤,用20%乙醇、0.05%NaN3或0.05mol/L NaOH保存柱子。
4楼2013-10-23 19:11:01
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daiti

铁虫 (小有名气)

求关注

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2013-10-22 10:58:14
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daiti

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by daiti at 2013-10-22 10:58:14
求关注

求关注啊!

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2013-10-23 14:18:14
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daiti

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by sayaya at 2013-10-23 19:11:01
PD-10预装脱盐柱,GE公司的产品,预装填料为Sephadex G-25。
用法很简单:
1)平衡PD-10柱,可以用纯水,也可以用适宜的缓冲液,视脱盐的目的而定。
2)上样,在柱子平衡后,将样品(1.5-2.5ml)加到柱子顶上。
...

谢谢您的热心回复。PD-10的柱子的购买还很不方便,查了下后现在改用生工代理的Spin-OUT离心式脱盐柱了,也不知道效果如何......
5楼2013-11-16 11:05:43
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