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sweet561

银虫 (小有名气)

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[求助] 跑蛋白胶时样品不能被压成一条线，而呈弥散状，求原因

目前，在用pPIC9K表达胰岛素的基因，但发现在跑SDS电泳时，样品不能被压成一条线，而是很宽很弥散，所以最终蛋白都无法确定，也换了Loading，还是不行，不知道是什么原因造成的，希望高手们能帮忙解答，谢谢！

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1楼 2013-10-20 09:36:51

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kumaxi

金虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

先看一下你的Mark 的条带是不是正常的，那就应该是你的制样有问题的，样品的盐浓度是不是太高了，样品是不是没有煮到位，如果mark都不正常，那就要考虑你的体系有没有问题，电极缓冲液的pH要一次到位，不能要HCl什么的调，否则条带扩散，SDS的量是不是对的，丙烯酰胺和甲叉丙烯酰胺有没有过期（胶凝了也跑不出好条带），以及你的过硫酸铵有没有过期，大概就考虑这些吧