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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 切胶纯化蛋白，加loadingbuffer跑sds-page没有条带。
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chen112323

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by danchai at 2013-10-21 11:56:12
首先保证切下来的胶含有目的条带，我是切一竖条染色，对应切的胶，胶回收用的是水平电泳槽，缓冲液50mmTris-HCl+1MMEDTA pH8.0，透析袋中加2-4ml缓冲液，跑胶30min，之后浓缩电泳可以看到条带

我的后来跑了又，有条带 但是好像降解了， 而且杂带较多。现在又用镍柱纯化了，非常感谢你！
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11楼2013-10-27 19:48:00
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danchai

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
11楼: Originally posted by chen112323 at 2013-10-27 19:48:00
我的后来跑了又，有条带 但是好像降解了， 而且杂带较多。现在又用镍柱纯化了，非常感谢你！...

跑胶的温度太高会引起降解，电泳时可以加冰浴
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12楼2013-10-29 12:01:34
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牛焕杰

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

怎么可能成絮状呢？我觉得问题在这，我跟你回收的方法是一样的，会不会是浓度太稀了？跑SDS-PAGE是应该要煮的
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13楼2014-10-20 21:07:34
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