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黑曲霉转化,表达质粒线性化位点选择
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| 表达质粒,marker质粒共转染黑曲霉,方法是PEG介导的原生质体转化,目前用2个完整质粒(未线性化)共转化能得到转化子,但是转化子只能P出目的基因不能P出marker基因,所以打算用2个质粒的线性化状态转化,但是不知道如何选择线性化位点?表达质粒表达框是:黑曲霉糖化酶启动子——目的基因——终止子,连在PUC19的MCS上 marker质粒表达框是:构巢曲霉GPD启动子——黑曲霉pyrG基因——终止子,就是质粒pAN7-1的hph基因替换了我的pyrG基因,我就是问 我的线性化位点应该选择哪边? |
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2楼2015-11-24 12:25:45













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