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amido

金虫 (小有名气)

[求助] 求助!——把pGL3与海肾的质粒弄混了

RT。从大肠杆菌里提取,按照试剂盒上的步骤一步一步来,马上要收产品了,有一步没做好标记,现在不知道哪个是pGL3,哪个是海肾的质粒。再提取一次好麻烦的。菌种信息我也不是太了解。不知道跑DNA凝胶能不能分开??
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-10-19 18:51:57
amido: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-10-21 08:39:04
DNA凝胶能够区分一个脱氧核苷酸对的差异,至少理论上如此,应该能够把两种质粒分开。你不用使用DNA凝胶吧两种质粒分离提纯,只要去很少量的两种质粒的样品,用凝胶电泳鉴定一下即可,根据鉴定样品的分子量对应的取样试剂即可以分开两种质粒。
DNA凝胶无法将定成功,则用质谱测定很少量的两种质粒的样品,根据鉴定样品的分子量对应的取样试剂必定可以分开两种质粒。
3楼2013-10-19 14:18:29
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shyh1983

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-10-19 18:52:03
amido: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-10-21 08:38:37
这个很简单,做一个单酶切或双酶切鉴定,然后跑个1%的琼脂糖胶检测就行了。单酶切之后就能够知道整个质粒的大小,看与那个质粒的预测大小一致肯定就是那个质粒。如果用双酶切,可以根据载体的大小和目的基因大小来判断和区分这2中质粒。
2楼2013-10-19 14:16:18
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