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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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cpu0343126

银虫 (小有名气)

[交流] 求助啊!!关于多糖分离的几个问题

小弟正在做一个天然药物的多糖分离,由于是第一次做有几个问题不是很懂,请教高手解答一下,不胜感激啊!!
      1.我用的是DEAE-cellulose柱,第一次粗分用了3个浓度的Nacl.最后用1M的Nacl冲完以后发现柱子后按要求对柱子再生,发现柱子上仍然颜色较深(样品没脱色),想请教一下现在柱子的颜色对后面的分离有没有影响,如果有影响应该怎么处理.
      2.关于样品的除盐,想问一下如何判断样品的盐已经除干净了,我们实验室有 salinitest HI98203 HANNA公司的(58.5g/L-5.58g/L) 还一个是 pure water tester (2-50几mg/l) 我测的时候第一个东西狂难用 读数跳来跳去的,第2个东西样品老超范围.我用1W的膜加水超滤除盐,感觉速度很慢效率不高.不知道高手们都是如何出盐,并判断盐是否干净的.
       还有就是用超滤除盐是否好?

以上2个问题麻烦高手解答
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cpu0343126

银虫 (小有名气)

  十分感谢各位的解答特别是2楼的,另外还有个问题想请教DEAE-cellulose我用的deae-cellulose 是以前师兄留下来的(但是基本没用过) 现在放在一个大烧杯里面沉淀下来可能有个2L多,我想问下有关上样量的问题,我看方积年9月分那篇综述最新写的综述说100g的deae-cellulose 的上样量大概是0.5g-1.5g,现在我那个DEAE是溶帐过的,100g的deae-cellulose 粉溶涨以后体积能有多少.另外它的上样量能到多少?
  还一个问题,GPC柱子上样以后大于10000分子量(用的11W的标准葡聚糖)的糖都没信号,浓度都到5mg/ml了不知道是什么问题.

CPU确实是药大,不过我今年毕业了呵呵~

[ Last edited by cpu0343126 on 2007-12-6 at 11:10 ]
5楼2007-12-06 11:06:11
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zerly

捐助贵宾 (小有名气)

我只会第一个问题,分离多糖后层析柱是会有褐色的一个印迹,对分离没什么影响,要是不放心可以重新清洗装柱,关于除盐我也不太会,我讲的也不一定对,还希望有高手能给出正解。
顺,不妄喜;逆,不惶馁;安,不奢逸;危,不惊惧;胸有激雷而面如平湖者,可拜上将军!
2楼2007-12-05 23:33:32
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liu200479

木虫 (正式写手)


karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供!
分离多糖后层析柱是会有褐色的一个印迹,是色素或与色素结合的多糖,是死吸附,脱盐有两种方法超滤或上Sephadex G15或G25脱盐,Sephadex G15或G25脱盐脱盐脱得干净但有死吸附。超滤法要想脱净,理论上时脱不净的,我用透析带透了两天的多糖,做核磁里面还有Cl信号,最好72以上。还有如果你条件摸得好,离子交换分出的多糖原子量分布也会较窄,注意的千万别超载,复习色谱理论你就明白超载会有什么结果,还有多糖上一遍柱会有相当一部分吸附,最好多收集些材料,现在分离方面真正能装好柱的很少,文献报道的错的比较多,你最好要说明书,比如DEAE-Cellulose,用水装柱就有断层,用碱性溶液装可以避免,还有流速的选择也很关键,你得知道每种填料它的流速范围,最佳流速,来摸索最佳流速,流速过快填料就被压坏了,分出的纯度自然不够,液相的GPC的流速过高1.6万左右的柱子就被压坏了,希望你要格外注意。
3楼2007-12-06 09:09:42
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liu200479

木虫 (正式写手)

cpu是中国药科大学?我以前是syphu
4楼2007-12-06 09:48:19
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