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郑顺利

金虫 (正式写手)

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[求助] 一直提不出棉花的总RNA，要崩溃了

这段时间一直在提棉花的RNA,试过CTAB法，SDS法，TransZol法等多种方法，把用的所有东西都重新处理过，可是就是没有提出来过，结果要么只有DNA，要么只有降解了的RNA，要么什么都没有，真的不知道该怎么办了

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努力过才不会留太多的遗憾

1楼 2013-10-16 12:06:53

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lmcyjxs

金虫 (正式写手)

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专业: 中药资源

引用回帖:

14楼: Originally posted by 郑顺利 at 2013-10-19 09:53:05
:hand我是从棉花叶片和根系中提取。请问你是怎么改善褐化现象的呢？你现在是用什么方法提的？降解严重吗？...

我现在用CTAB-LiCL法提的，在LiCL沉淀那步加入终浓度为1%的巯基乙醇，明显改善沉淀颜色，只是还是降解，说明问题不仅出在这里，应该是一开始研磨到裂解这步出现问题较为可能。。。另外关于棉花的提取已有文献报道了啊，按他们的方法还是提不出来吗？题目是：用CTAB-PVP法提取棉花各组织总RNA的研究；
我认为你的材料假如是新鲜的，还要保证研磨没有问题，裂解是否充分，不要加太多的粉末，粉末太多就裂解不充分，就容易降解。
望多多交流！