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trinity888

木虫 (小有名气)

[求助] 求助:细胞核内蛋白靶向抗体在脂质体帮助下能进入细胞质,却不能进入细胞核

我们将细胞核内蛋白靶向抗体与FITCS结合后,用脂质体包裹,对于用甲醇固定后的死细胞,在脂质体帮助下能够很好的靶向细胞核内的蛋白,但对于活细胞却只能进入细胞质,却不能靶向进入细胞核。而且我们试过用微注射的方法将抗体与FITCS结合体注入细胞质内,却能够很好的靶向核内蛋白。搞了3个月了,试了多种办法,还是解决不了这个问题,求帮助,求集思广益。相关专业的虫子们你们有什么可行的办法,想法或者意见能够帮助我解决这问题。万分感谢!!!
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我连博士都决定读了,地球人已经阻止不了我了!!!
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duruo

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【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
trinity888: 金币+10, 有帮助, 你的意见很好,我的想法是主要通过脂质体帮助抗体进入细胞内,因为我们做过微注射的实验,抗体可以自己从活细胞的细胞质靶向细胞核,并且我们采用的也是阳离子脂质体,加入了DOTAP帮助靶向。现在主要的问题我想可能是抗体进入细胞后没有完全和脂质体分开。 2013-10-17 19:52:28
trinity888: 金币+20, 有帮助, 我已经找到了一个用核定位序列NLS来向细胞核内导入抗体的文献,我将试一下,还是谢谢你的帮助 2013-11-11 17:39:22
我不是学生物的,但有几个问题值得注意
1、死细胞和活细胞的核膜性质,包括核膜孔径大小是否有差别?
2、脂质体的大小是否能穿过核膜孔?
3、荧光标记蛋白能否从脂质体中释放出来?
4、是否可以改用阳离子脂质体,增加其进入细胞核的几率?
能攻心则反侧自消,从古知兵非好战;不审势即宽严皆误,后来治蜀要深思
2楼2013-10-17 16:28:11
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