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trinity888

木虫 (小有名气)

[求助] 求助：细胞核内蛋白靶向抗体在脂质体帮助下能进入细胞质，却不能进入细胞核

我们将细胞核内蛋白靶向抗体与FITCS结合后，用脂质体包裹，对于用甲醇固定后的死细胞，在脂质体帮助下能够很好的靶向细胞核内的蛋白，但对于活细胞却只能进入细胞质，却不能靶向进入细胞核。而且我们试过用微注射的方法将抗体与FITCS结合体注入细胞质内，却能够很好的靶向核内蛋白。搞了3个月了，试了多种办法，还是解决不了这个问题，求帮助，求集思广益。相关专业的虫子们你们有什么可行的办法，想法或者意见能够帮助我解决这问题。万分感谢！！！
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我连博士都决定读了，地球人已经阻止不了我了！！！
1楼 2013-10-15 21:41:45
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duruo

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【答案】应助回帖

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感谢参与，应助指数 +1
trinity888: 金币+10, ★有帮助, 你的意见很好，我的想法是主要通过脂质体帮助抗体进入细胞内，因为我们做过微注射的实验，抗体可以自己从活细胞的细胞质靶向细胞核，并且我们采用的也是阳离子脂质体，加入了DOTAP帮助靶向。现在主要的问题我想可能是抗体进入细胞后没有完全和脂质体分开。 2013-10-17 19:52:28
trinity888: 金币+20, ★有帮助, 我已经找到了一个用核定位序列NLS来向细胞核内导入抗体的文献，我将试一下，还是谢谢你的帮助 2013-11-11 17:39:22
我不是学生物的，但有几个问题值得注意
1、死细胞和活细胞的核膜性质，包括核膜孔径大小是否有差别？
2、脂质体的大小是否能穿过核膜孔？
3、荧光标记蛋白能否从脂质体中释放出来？
4、是否可以改用阳离子脂质体，增加其进入细胞核的几率？
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能攻心则反侧自消，从古知兵非好战；不审势即宽严皆误，后来治蜀要深思
2楼2013-10-17 16:28:11
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