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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 质粒连接问题
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木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by fengbing1116 at 2013-10-17 10:56:11
嗯，拿去测序了，现在是不同没进行单酶切切得高度不一样，为什么呢？...

你得确定你切下来的片段大小，片段大小不一样，高度肯定不一样
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对于誓言一定要实现。
11楼2013-10-17 22:07:25
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fengbing1116

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 黑盖儿 at 2013-10-17 11:45:56
不知你回收的时候条带亮度怎样？如果很亮的话建议你稍微增加一点限制性内切酶的用量，并适当延长时间。再就是检查一下你的限制性内切酶在公用buffer中的活性怎样，如果两种酶在公用buffer中活性相差很大，会出现一个 ...

我是单酶切，用的Pst1酶，过夜切出现酶切不完全的问题，该怎么办？
赞一下 回复此楼
幸福就是一种心态~
12楼2013-10-18 10:52:21
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黑盖儿

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

稍微加大一下酶的用量，延长一下酶切时间，但不要超过16小时，或者用buffer稀释一下你的质粒，再就是酶切的温度，体系调整一下应该能切开。
赞一下 回复此楼
我给不了你宝马香车，锦衣玉食，但我会用一辈子去疼你，爱你，保护你
13楼2013-10-19 07:53:34
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