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宸登abc

银虫 (初入文坛)

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引用回帖:

10楼: Originally posted by 小小技术官 at 2013-10-15 14:38:45
纯化不出来，说明His没有表达，再加上比预期的要小。很有可能是表达截断了，这种情况一般是稀有密码子引起的。建议1，用Nde 下游的HIS 作为纯化标签纯化。2，突变稀有密码子。

应该是被截断了，我换个表达菌株试试先。。。

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向学术狂人前进！！！

11楼2013-10-16 10:16:37

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LOVEFHC

新虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

mw偏差，跟你的his标签及你的目的蛋白特性都有关系，组氨酸本身就带正电荷，其中his标签由于是6个组氨酸，为碱性氨基酸，带有较强正电荷，可能导致融合蛋白的迁移速度。我可以共享一篇中科院的文献-《SDSPAGE法测定Histag融合蛋白分子量产生偏差的原因》

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12楼2014-01-28 15:27:05

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别闹了112

新虫 (小有名气)

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引用回帖:

12楼: Originally posted by LOVEFHC at 2014-01-28 15:27:05
mw偏差，跟你的his标签及你的目的蛋白特性都有关系，组氨酸本身就带正电荷，其中his标签由于是6个组氨酸，为碱性氨基酸，带有较强正电荷，可能导致融合蛋白的迁移速度。我可以共享一篇中科院的文献-《SDSPAGE法测定 ...

求分享文献

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13楼2017-05-14 09:55:36

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