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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白异源表达，条带大小不对啊
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宸登abc

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 小小技术官 at 2013-10-15 14:38:45
纯化不出来，说明His没有表达，再加上比预期的要小。很有可能是表达截断了，这种情况一般是稀有密码子引起的。建议1，用Nde 下游的HIS 作为纯化标签 纯化。2，突变稀有密码子。

应该是被截断了，我换个表达菌株试试先。。。
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向学术狂人前进！！！
11楼2013-10-16 10:16:37
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LOVEFHC

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

mw偏差，跟你的his标签及你的目的蛋白特性都有关系，组氨酸本身就带正电荷，其中his标签由于是6个组氨酸，为碱性氨基酸，带有较强正电荷，可能导致融合蛋白的迁移速度。我可以共享一篇中科院的文献-《SDSPAGE法测定Histag融合蛋白分子量产生偏差的原因》
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12楼2014-01-28 15:27:05
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别闹了112

新虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by LOVEFHC at 2014-01-28 15:27:05
mw偏差，跟你的his标签及你的目的蛋白特性都有关系，组氨酸本身就带正电荷，其中his标签由于是6个组氨酸，为碱性氨基酸，带有较强正电荷，可能导致融合蛋白的迁移速度。我可以共享一篇中科院的文献-《SDSPAGE法测定 ...

求分享文献

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13楼2017-05-14 09:55:36
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