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α-葡萄糖苷酶抑制剂的筛选模型问题 已有1人参与
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| 大家好,我正做关于抑制剂对α-葡萄糖苷酶的抑制效应,我正打算先做个初筛,也看了有关方面的文献,具体步骤都很含糊,包括酶和底物的稀释浓度、具体的用量,反应时间,用什么样的磷酸盐缓冲液以及其PH,都没有准确的统一的数据,想问下做过的虫友们,我现在只是简单的初筛,能否酶和底物都先用最大的剂量,我想只有这样才能保证初筛的准确性,我想做PNPG为底物的筛选模型,我还想问还要不要联合其他的酶抑制剂筛选模型,以防止漏筛,还必须做阳性对照吗?我这样简单的初筛有必要做酶反应体系正交优化吗?(优化方面包括:酶浓度、底物浓度、温度、PH、抑制剂浓度、抑制剂作用时间),谢谢亲们提出宝贵的意见! |
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