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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC检测天冬氨酸的一些求助QAQ
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漫天流萤

新虫 (小有名气)

[求助] HPLC检测天冬氨酸的一些求助QAQ

我想请教各位大侠一些问题
1、用HPLC检测氨基酸含量的时候，用的流动相的酸碱性对分离效果会有影响吗？
2、用什么柱子好呀，用C18柱行吗？
3、盐溶液流动相和有机流动相互混的时候，产生晶体析出怎么办？降低盐溶液浓度？

多谢各位！！！！！
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1楼 2013-10-11 14:10:26
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tianxia119wo

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
氨基酸很多都是手性的，检测需要手性柱的，这里有一篇文献希望对你有所帮助。
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浙大化学系本科生,希望能和各位虫友多多交流,互相帮助.
2楼2013-10-11 15:17:39
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漫天流萤

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by tianxia119wo at 2013-10-11 15:17:39
氨基酸很多都是手性的，检测需要手性柱的，这里有一篇文献希望对你有所帮助。

谢谢
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3楼2013-10-11 15:36:36
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tianxia119wo

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

能帮上忙就好，盐溶液遇上有机相析出。。。感觉浓度一般都控制的很低的。文献里就是0.05mol/L
pH值估计影响很大的，很多测定氨基酸的条件都较为严格的控制了pH值。
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浙大化学系本科生,希望能和各位虫友多多交流,互相帮助.
4楼2013-10-11 16:10:53
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漫天流萤

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by tianxia119wo at 2013-10-11 16:10:53
能帮上忙就好，盐溶液遇上有机相析出。。。感觉浓度一般都控制的很低的。文献里就是0.05mol/L
pH值估计影响很大的，很多测定氨基酸的条件都较为严格的控制了pH值。

嗯，是啊，我今天用的是0.04 mol/L的缓冲溶液，结果还是造成堵塞了。
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5楼2013-10-11 16:24:44
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ajshen

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
crity328: 金币+1, 感谢交流，欢迎常来` 2013-10-12 08:53:27
用C18柱一定要做衍生，要不然保留不住。
要不然就不做衍生，直接用亲水柱，但是需要示差折光检测器或者ELSD检测器。
另外，常规的HPLC系统最好不要用HCl或者盐酸盐，对系统腐蚀性很大的。
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JESSICA
6楼2013-10-11 19:02:27
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漫天流萤

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by ajshen at 2013-10-11 19:02:27
用C18柱一定要做衍生，要不然保留不住。
要不然就不做衍生，直接用亲水柱，但是需要示差折光检测器或者ELSD检测器。
另外，常规的HPLC系统最好不要用HCl或者盐酸盐，对系统腐蚀性很大的。

嗯嗯，是准备用柱前衍生的。多谢啦~~~另外，是不是用接近中性的缓冲液会比较好呀
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7楼2013-10-11 20:24:41
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ajshen

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
漫天流萤: 金币+10, ★★★很有帮助, 多谢啦 2013-10-12 09:06:38
引用回帖:
7楼: Originally posted by 漫天流萤 at 2013-10-11 20:24:41
嗯嗯，是准备用柱前衍生的。多谢啦~~~另外，是不是用接近中性的缓冲液会比较好呀...

我看文献里面是有用近中性的缓冲液的。不过我觉得酸性缓冲液应该是没有问题的，抑制了天冬氨酸羧基的电离，使其在反相C18柱的保留更好，有可能选择性也更好啦~
不过我没做过衍生化的氨基酸，楼主可以尝试一下~
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JESSICA
8楼2013-10-12 08:46:29
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我要学习la

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by ajshen at 2013-10-11 19:02:27
用C18柱一定要做衍生，要不然保留不住。
要不然就不做衍生，直接用亲水柱，但是需要示差折光检测器或者ELSD检测器。
另外，常规的HPLC系统最好不要用HCl或者盐酸盐，对系统腐蚀性很大的。

请问，用示差折光检测仪器检测的话，对柱子有什么要求吗？能用Aminex HPX–87H糖分析吗？谢谢
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9楼2016-11-24 20:01:32
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