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漫天流萤

新虫 (小有名气)

[求助] HPLC检测天冬氨酸的一些求助QAQ

我想请教各位大侠一些问题
1、用HPLC检测氨基酸含量的时候,用的流动相的酸碱性对分离效果会有影响吗?
2、用什么柱子好呀,用C18柱行吗?
3、盐溶液流动相和有机流动相互混的时候,产生晶体析出怎么办?降低盐溶液浓度?

多谢各位!!!!!
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tianxia119wo

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
氨基酸很多都是手性的,检测需要手性柱的,这里有一篇文献希望对你有所帮助。

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浙大化学系本科生,希望能和各位虫友多多交流,互相帮助.
2楼2013-10-11 15:17:39
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漫天流萤

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by tianxia119wo at 2013-10-11 15:17:39
氨基酸很多都是手性的,检测需要手性柱的,这里有一篇文献希望对你有所帮助。

谢谢
3楼2013-10-11 15:36:36
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tianxia119wo

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

能帮上忙就好,盐溶液遇上有机相析出。。。感觉浓度一般都控制的很低的。文献里就是0.05mol/L
pH值估计影响很大的,很多测定氨基酸的条件都较为严格的控制了pH值。
浙大化学系本科生,希望能和各位虫友多多交流,互相帮助.
4楼2013-10-11 16:10:53
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漫天流萤

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by tianxia119wo at 2013-10-11 16:10:53
能帮上忙就好,盐溶液遇上有机相析出。。。感觉浓度一般都控制的很低的。文献里就是0.05mol/L
pH值估计影响很大的,很多测定氨基酸的条件都较为严格的控制了pH值。

嗯,是啊,我今天用的是0.04 mol/L的缓冲溶液,结果还是造成堵塞了。
5楼2013-10-11 16:24:44
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ajshen

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
crity328: 金币+1, 感谢交流,欢迎常来` 2013-10-12 08:53:27
用C18柱一定要做衍生,要不然保留不住。
要不然就不做衍生,直接用亲水柱,但是需要示差折光检测器或者ELSD检测器。
另外,常规的HPLC系统最好不要用HCl或者盐酸盐,对系统腐蚀性很大的。
JESSICA
6楼2013-10-11 19:02:27
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漫天流萤

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by ajshen at 2013-10-11 19:02:27
用C18柱一定要做衍生,要不然保留不住。
要不然就不做衍生,直接用亲水柱,但是需要示差折光检测器或者ELSD检测器。
另外,常规的HPLC系统最好不要用HCl或者盐酸盐,对系统腐蚀性很大的。

嗯嗯,是准备用柱前衍生的。多谢啦~~~另外,是不是用接近中性的缓冲液会比较好呀
7楼2013-10-11 20:24:41
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ajshen

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
漫天流萤: 金币+10, ★★★很有帮助, 多谢啦 2013-10-12 09:06:38
引用回帖:
7楼: Originally posted by 漫天流萤 at 2013-10-11 20:24:41
嗯嗯,是准备用柱前衍生的。多谢啦~~~另外,是不是用接近中性的缓冲液会比较好呀...

我看文献里面是有用近中性的缓冲液的。不过我觉得酸性缓冲液应该是没有问题的,抑制了天冬氨酸羧基的电离,使其在反相C18柱的保留更好,有可能选择性也更好啦~
不过我没做过衍生化的氨基酸,楼主可以尝试一下~
JESSICA
8楼2013-10-12 08:46:29
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我要学习la

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by ajshen at 2013-10-11 19:02:27
用C18柱一定要做衍生,要不然保留不住。
要不然就不做衍生,直接用亲水柱,但是需要示差折光检测器或者ELSD检测器。
另外,常规的HPLC系统最好不要用HCl或者盐酸盐,对系统腐蚀性很大的。

请问,用示差折光检测仪器检测的话,对柱子有什么要求吗?能用Aminex HPX–87H糖分析吗?谢谢
9楼2016-11-24 20:01:32
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