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新虫 (小有名气)

[求助] HPLC检测天冬氨酸的一些求助QAQ

我想请教各位大侠一些问题
1、用HPLC检测氨基酸含量的时候，用的流动相的酸碱性对分离效果会有影响吗？
2、用什么柱子好呀，用C18柱行吗？
3、盐溶液流动相和有机流动相互混的时候，产生晶体析出怎么办？降低盐溶液浓度？

多谢各位！！！！！

1楼 2013-10-11 14:10:26

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木虫 (小有名气)

★
感谢参与，应助指数 +1
crity328: 金币+1, 感谢交流，欢迎常来` 2013-10-12 08:53:27

用C18柱一定要做衍生，要不然保留不住。
要不然就不做衍生，直接用亲水柱，但是需要示差折光检测器或者ELSD检测器。
另外，常规的HPLC系统最好不要用HCl或者盐酸盐，对系统腐蚀性很大的。

JESSICA

6楼2013-10-11 19:02:27

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木虫 (小有名气)

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漫天流萤: 金币+10, ★★★很有帮助, 多谢啦 2013-10-12 09:06:38

引用回帖:

7楼: Originally posted by 漫天流萤 at 2013-10-11 20:24:41
嗯嗯，是准备用柱前衍生的。多谢啦~~~另外，是不是用接近中性的缓冲液会比较好呀...

我看文献里面是有用近中性的缓冲液的。不过我觉得酸性缓冲液应该是没有问题的，抑制了天冬氨酸羧基的电离，使其在反相C18柱的保留更好，有可能选择性也更好啦~
不过我没做过衍生化的氨基酸，楼主可以尝试一下~

JESSICA

8楼2013-10-12 08:46:29

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