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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 柱前AQC衍生HPLC-PAD测氨基酸，两个峰分不开？求助求助！
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子时

至尊木虫 (著名写手)

[求助] 柱前AQC衍生HPLC-PAD测氨基酸，两个峰分不开？求助求助！

AQC柱前衍生分析17种氨基酸氨基酸
在20min左右的Arg和Thr无法分开，求高手指教！

色谱系统：Waters e2695-2998
色谱柱：AccQ•Tag 氨基酸柱（3.9×150mm）
流动相A：Waters Elution A （1:10）配制
流动相B：乙腈
流动相C：高纯水
柱温：37℃
检测器：PAD （248nm）
梯度条件如下：
柱前AQC衍生HPLC-PAD测氨基酸，两个峰分不开？求助求助！

氨基酸出峰顺序：Asp, Ser, Glu, Gly, His, NH3, Arg, Thr, Ala, Pro, Cys2, Tyr, Val, Met, Lys, Ile, Leu, Phe.
柱前AQC衍生HPLC-PAD测氨基酸，两个峰分不开？求助求助！-1
柱前AQC衍生HPLC-PAD测氨基酸，两个峰分不开？求助求助！-2[ 来自小组 食品科学 ]

[ Last edited by 子时 on 2013-10-11 at 13:42 ]
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  • 附件 1 : 氨基酸谱图.docx
    • 2013-10-11 13:33:47, 45.7 K

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沙子握得越紧流失的越快，适度的去看待身边的点点滴滴。
1楼 2013-10-11 13:35:21
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子时

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by fangfangfa at 2013-10-11 18:38:37
如同上述后者办法，18-30min之间出的峰分三组，可以分段洗脱，将18-22min的梯度减缓，如不变起始比例，延长时间，22-27min梯度可以不变，可以将原28min的梯度提高提早1min，总体下来时间也许并没延长。

尝试了19.5-21min之间缓慢洗脱（曲线9），乙腈浓度在10-11之间，依旧无法分来，差不多下班个峰连体。
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沙子握得越紧流失的越快，适度的去看待身边的点点滴滴。
4楼2013-10-15 08:54:48
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alarace

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
子时: 金币+20, ★有帮助 2013-10-18 15:17:42
两个分不开的氨基酸出峰时间处于20-22min，所以，延长第4和5步（即18-29min）的时间，也可以增加一个时间区域，把溶液A的浓度梯度下降放缓。
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2楼2013-10-11 16:21:18
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fangfangfa

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
子时: 金币+20, ★有帮助 2013-10-18 15:17:56
子时(changle9139代发): 金币+20 2015-11-17 15:39:24
如同上述后者办法，18-30min之间出的峰分三组，可以分段洗脱，将18-22min的梯度减缓，如不变起始比例，延长时间，22-27min梯度可以不变，可以将原28min的梯度提高提早1min，总体下来时间也许并没延长。
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3楼2013-10-11 18:38:37
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子时

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by alarace at 2013-10-11 16:21:18
两个分不开的氨基酸出峰时间处于20-22min，所以，延长第4和5步（即18-29min）的时间，也可以增加一个时间区域，把溶液A的浓度梯度下降放缓。

大概计算了一下Arg和Thr的乙腈洗脱浓度都处在10-11%之间，不知如何增加区间？
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沙子握得越紧流失的越快，适度的去看待身边的点点滴滴。
5楼2013-10-15 08:56:38
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