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子时

至尊木虫 (著名写手)

[求助] 柱前AQC衍生HPLC-PAD测氨基酸,两个峰分不开?求助求助!

AQC柱前衍生分析17种氨基酸氨基酸
在20min左右的Arg和Thr无法分开,求高手指教!

色谱系统:Waters e2695-2998
色谱柱:AccQ•Tag 氨基酸柱(3.9×150mm)
流动相A:Waters Elution A (1:10)配制
流动相B:乙腈
流动相C:高纯水
柱温:37℃
检测器:PAD (248nm)
梯度条件如下:
柱前AQC衍生HPLC-PAD测氨基酸,两个峰分不开?求助求助!

氨基酸出峰顺序:Asp, Ser, Glu, Gly, His, NH3, Arg, Thr, Ala, Pro, Cys2, Tyr, Val, Met, Lys, Ile, Leu, Phe.
柱前AQC衍生HPLC-PAD测氨基酸,两个峰分不开?求助求助!-1
柱前AQC衍生HPLC-PAD测氨基酸,两个峰分不开?求助求助!-2[ 来自小组 食品科学 ]

[ Last edited by 子时 on 2013-10-11 at 13:42 ]
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  • 附件 1 : 氨基酸谱图.docx
  • 2013-10-11 13:33:47, 45.7 K

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沙子握得越紧流失的越快,适度的去看待身边的点点滴滴。
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fangfangfa

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
子时: 金币+20, 有帮助 2013-10-18 15:17:56
子时(changle9139代发): 金币+20 2015-11-17 15:39:24
如同上述后者办法,18-30min之间出的峰分三组,可以分段洗脱,将18-22min的梯度减缓,如不变起始比例,延长时间,22-27min梯度可以不变,可以将原28min的梯度提高提早1min,总体下来时间也许并没延长。
3楼2013-10-11 18:38:37
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alarace

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
子时: 金币+20, 有帮助 2013-10-18 15:17:42
两个分不开的氨基酸出峰时间处于20-22min,所以,延长第4和5步(即18-29min)的时间,也可以增加一个时间区域,把溶液A的浓度梯度下降放缓。
2楼2013-10-11 16:21:18
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子时

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by fangfangfa at 2013-10-11 18:38:37
如同上述后者办法,18-30min之间出的峰分三组,可以分段洗脱,将18-22min的梯度减缓,如不变起始比例,延长时间,22-27min梯度可以不变,可以将原28min的梯度提高提早1min,总体下来时间也许并没延长。

尝试了19.5-21min之间缓慢洗脱(曲线9),乙腈浓度在10-11之间,依旧无法分来,差不多下班个峰连体。
沙子握得越紧流失的越快,适度的去看待身边的点点滴滴。
4楼2013-10-15 08:54:48
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子时

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by alarace at 2013-10-11 16:21:18
两个分不开的氨基酸出峰时间处于20-22min,所以,延长第4和5步(即18-29min)的时间,也可以增加一个时间区域,把溶液A的浓度梯度下降放缓。

大概计算了一下Arg和Thr的乙腈洗脱浓度都处在10-11%之间,不知如何增加区间?
沙子握得越紧流失的越快,适度的去看待身边的点点滴滴。
5楼2013-10-15 08:56:38
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