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gyesang

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10楼: Originally posted by tiankong很蓝 at 2013-10-14 21:35:20
但是含该质粒的菌是非甲基化的...

你用的是什么大肠杆菌菌株?

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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
11楼2013-10-15 10:15:45
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tiankong很蓝

银虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
11楼: Originally posted by gyesang at 2013-10-15 10:15:45
你用的是什么大肠杆菌菌株?...

我也不清楚,只知道该菌是非甲基化的。难道位点是否被甲基化不仅与菌株是否是非甲基化有关,还与该菌株的种类有关?只知道该菌株是非甲基化的不行吗?请指教
深呼吸,嘴角上扬,告诉自己:我很好!!!
12楼2013-10-22 10:44:50
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gyesang

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引用回帖:
12楼: Originally posted by tiankong很蓝 at 2013-10-22 10:44:50
我也不清楚,只知道该菌是非甲基化的。难道位点是否被甲基化不仅与菌株是否是非甲基化有关,还与该菌株的种类有关?只知道该菌株是非甲基化的不行吗?请指教...

那是没有问题的啊,应该可以切开的啊
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
13楼2013-10-22 22:54:54
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liuyu_sdili

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-10-29 18:18:48
这种情况也遇到过。我师弟构建了一个载体,有一个XbaI酶切位点。用另外一个酶单酶切大小正好是载体与插入片段的加和,但是用XbaI就是切不动,后来测序发现确实是连上了,并且XbaI酶切位点序列也是正确的,我们用的宿主是DH5α,希望这些经验对你有帮助~~~
14楼2013-10-23 10:50:13
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jinying1123

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
10楼: Originally posted by tiankong很蓝 at 2013-10-14 21:35:20
但是含该质粒的菌是非甲基化的...

用去甲基化的感受态转化后,能不能被XbaI切开了么?试过了么
15楼2014-11-13 16:02:04
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jinying1123

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
14楼: Originally posted by liuyu_sdili at 2013-10-23 10:50:13
这种情况也遇到过。我师弟构建了一个载体,有一个XbaI酶切位点。用另外一个酶单酶切大小正好是载体与插入片段的加和,但是用XbaI就是切不动,后来测序发现确实是连上了,并且XbaI酶切位点序列也是正确的,我们用的宿 ...

DH5a是去甲基化的感受态么
16楼2014-11-13 16:03:59
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chun828

铜虫 (初入文坛)

XbaI位点后紧邻的碱基是TC时,即序列为TCTAGA TC时,XbaI 位点的甲基化(Dam甲基化)那么该序列的甲基化将不会被切开!
阅读经典,成就智慧
17楼2014-11-14 22:48:31
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464374253

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
16楼: Originally posted by jinying1123 at 2014-11-13 16:03:59
DH5a是去甲基化的感受态么...

不是的
18楼2015-10-12 20:08:14
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464374253

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
15楼: Originally posted by jinying1123 at 2014-11-13 16:02:04
用去甲基化的感受态转化后,能不能被XbaI切开了么?试过了么...

我的就是这个样子  切不开
19楼2015-10-12 20:09:34
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wang0371

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

谢谢各位的回复,我也学习了

[ 发自小木虫客户端 ]
基于青睐有准备的人
20楼2015-10-13 23:38:02
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