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tiankong很蓝

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11楼2013-10-15 10:15:45

tiankong很蓝

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11楼: Originally posted by gyesang at 2013-10-15 10:15:45
你用的是什么大肠杆菌菌株？...

我也不清楚，只知道该菌是非甲基化的。难道位点是否被甲基化不仅与菌株是否是非甲基化有关，还与该菌株的种类有关？只知道该菌株是非甲基化的不行吗？请指教

深呼吸，嘴角上扬，告诉自己：我很好！！！

12楼2013-10-22 10:44:50

gyesang

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引用回帖:

12楼: Originally posted by tiankong很蓝 at 2013-10-22 10:44:50
我也不清楚，只知道该菌是非甲基化的。难道位点是否被甲基化不仅与菌株是否是非甲基化有关，还与该菌株的种类有关？只知道该菌株是非甲基化的不行吗？请指教...

那是没有问题的啊，应该可以切开的啊

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13楼2013-10-22 22:54:54

liuyu_sdili

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【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-10-29 18:18:48

这种情况也遇到过。我师弟构建了一个载体，有一个XbaI酶切位点。用另外一个酶单酶切大小正好是载体与插入片段的加和，但是用XbaI就是切不动，后来测序发现确实是连上了，并且XbaI酶切位点序列也是正确的，我们用的宿主是DH5α，希望这些经验对你有帮助~~~

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14楼2013-10-23 10:50:13

jinying1123

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10楼: Originally posted by tiankong很蓝 at 2013-10-14 21:35:20
但是含该质粒的菌是非甲基化的...

用去甲基化的感受态转化后，能不能被XbaI切开了么？试过了么

15楼2014-11-13 16:02:04

jinying1123

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引用回帖:

14楼: Originally posted by liuyu_sdili at 2013-10-23 10:50:13
这种情况也遇到过。我师弟构建了一个载体，有一个XbaI酶切位点。用另外一个酶单酶切大小正好是载体与插入片段的加和，但是用XbaI就是切不动，后来测序发现确实是连上了，并且XbaI酶切位点序列也是正确的，我们用的宿 ...

DH5a是去甲基化的感受态么

16楼2014-11-13 16:03:59