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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于免疫印迹半干转膜问题，在线等急！！！
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拜仁主义

银虫 (小有名气)

[求助] 关于免疫印迹半干转膜问题，在线等急！！！

本人正在跑的蛋白是 NF-κB抑制蛋白IκB-a ，分子量大约36-39KD，电泳后要转膜，用的是PVDF膜（0.45um），采用半干转膜法，请问各位有没有做过这个蛋白的，转膜时的电流和时间设置为多少才合适？
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天然药物药理。。。。。。。
1楼 2013-10-10 15:38:38
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-10-11 10:02:06
只要不是特别大或者特别小的蛋白，转膜条件就用标准做法。半干转移根据你胶和膜的面积计算电流，稳流转1h。
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2楼2013-10-11 00:34:14
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拜仁主义

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-10-11 00:34:14
只要不是特别大或者特别小的蛋白，转膜条件就用标准做法。半干转移根据你胶和膜的面积计算电流，稳流转1h。

电流1mA-2mA/cm2，按膜面积计算，是这样吗？
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天然药物药理。。。。。。。
3楼2013-10-11 12:52:13
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 拜仁主义 at 2013-10-11 12:52:13
电流1mA-2mA/cm2，按膜面积计算，是这样吗？...

我用的是电流0.7-1mA/cm2。
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4楼2013-10-11 14:30:01
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