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拜仁主义

银虫 (小有名气)

[求助] 关于免疫印迹半干转膜问题,在线等急!!!

本人正在跑的蛋白是 NF-κB抑制蛋白IκB-a ,分子量大约36-39KD,电泳后要转膜,用的是PVDF膜(0.45um),采用半干转膜法,请问各位有没有做过这个蛋白的,转膜时的电流和时间设置为多少才合适?
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天然药物药理。。。。。。。
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-10-11 10:02:06
只要不是特别大或者特别小的蛋白,转膜条件就用标准做法。半干转移根据你胶和膜的面积计算电流,稳流转1h。
2楼2013-10-11 00:34:14
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拜仁主义

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-10-11 00:34:14
只要不是特别大或者特别小的蛋白,转膜条件就用标准做法。半干转移根据你胶和膜的面积计算电流,稳流转1h。

电流1mA-2mA/cm2,按膜面积计算,是这样吗?
天然药物药理。。。。。。。
3楼2013-10-11 12:52:13
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 拜仁主义 at 2013-10-11 12:52:13
电流1mA-2mA/cm2,按膜面积计算,是这样吗?...

我用的是电流0.7-1mA/cm2。
4楼2013-10-11 14:30:01
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