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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 微米和纳米 » 学术交流 » 纳米材料上偶联抗体之后老有沉淀，分散性很差，求高手讨论解决
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Jane-zhu

银虫 (小有名气)

[求助] 纳米材料上偶联抗体之后老有沉淀，分散性很差，求高手讨论解决

本人最近做上转换发光材料上偶联抗体，材料上修饰的是羧基，用的EDC,NHS活化，但是偶联之后老是有沉淀，感觉纳米材料团聚了，颗粒变大，分散性不好，请问大神们有没有解决方法？
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年年岁岁花相似，岁岁年年人不同。
1楼 2013-10-09 17:33:42
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Roy_He

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by Jane-zhu at 2013-10-10 17:28:10
之前试了PH5.6的MES，偶联的效果不理想，蛋白都会析出来...

唉，我也是在做羧基磁珠连蛋白的实验，PH6.0的MES现配的EDC+NHS 活化羧基，然后加抗体，确实感觉不理想啊，反应的体系就是羧基磁珠+抗体+MES，对照是羧基磁珠+BSA+MES，2mg磁珠对应50ug抗体。结果反应完了磁分离取上清测蛋白，用G250和Nanodrop1000测出来感觉偶联率很低啊，另外BSA那组甚至都没偶联上，上清中测出来的BSA和原液的BSA浓度几乎一样。。。非常纳闷，麻烦看见的虫友给个建议！！
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人生唯一的安全感，来自于充分体验人生的不安全感。
28楼2013-10-15 15:32:26
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无名222

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
Jane-zhu: 金币+1, ★有帮助 2013-10-10 10:04:32
有沉淀是正常的，反应后过滤一下，也可能是偶联剂加过了，引起纳米离子团聚。。。
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2楼2013-10-09 20:05:46
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Birdie

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我跟你碰到了一样的情况，请问你的羧基是怎么修饰上去的？修饰羧基后纳米粒子在水溶液中稳定吗？
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3楼2013-10-10 00:06:24
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Jane-zhu

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 无名222 at 2013-10-09 20:05:46
有沉淀是正常的，反应后过滤一下，也可能是偶联剂加过了，引起纳米离子团聚。。。

我的沉淀很多，有什么解决办法呢
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年年岁岁花相似，岁岁年年人不同。
4楼2013-10-10 10:04:12
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