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michaelzang

木虫 (小有名气)

[求助] 脂质体的制备---薄膜分散的困惑

各位脂质体达人,大家好:
我现在正在制备脂质体,期间遭遇了不少问题,希望大家不吝赐教给我这个笨人予以解惑。我是采用普通磷脂和胆固醇进行处方筛选,主要考察粒径稳定性等,而包封率药物释放等,由于后期需要用其他功能磷脂予以替换,故不予考察。此外,由于考虑到后期的功能磷脂替换后,考察脂质体用量较小,故所用磷脂胆固醇用量较小。磷脂用氯仿溶解配成10mg/ml的储备液,胆固醇为5mg/ml的氯仿储备液,储存时置于-20℃冰箱贮存。制备脂质体时,按照质量比磷脂/胆固醇=2:1,3:1 , 4:1 , 5:1 ,6:1 其中磷脂质量约为10mg,胆固醇为相应的质量,按照处方量取磷脂、胆固醇储备液加入50ml茄型瓶中,再加入3ml的氯仿,于37℃旋转蒸发成膜除氯仿,待茄型瓶中见不到明显氯仿液体的时候,再旋蒸30~60min 后 , 将水化温度升至50℃加入3ml的PBS水化,遇见的问题就出现了,根本水化不下来,后来改用稀释10倍的PBS和水水化也是相当困难,并且水化下来的脂质体溶液中有絮状的沉淀。望达人们路见不平一声吼,指出我的问的问题所在,谢谢大家!
PS: PBS的配方:
                      NaCl                                      8   g
                      KCl                                       0.2 g
                      Na2HPO4.12H2O                   2.9 g
                      KH2PO4                                0.2 g
_________________________________________________
加蒸馏水         1000ml

[ Last edited by michaelzang on 2013-10-9 at 10:03 ]
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banxiashuisu

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

传统的水化方法也是要不停振摇,通过外力使膜与瓶壁脱离,如涡旋震荡,此处我采用的是短时水浴超声~
6楼2013-12-02 20:33:11
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川农一枝花

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
michaelzang: 金币+5, 有帮助, 谢谢你的回复 2013-10-09 16:33:40
薄膜分散法是制备脂质体最经典的方法,该方法是将磷脂材料溶解在适当有机溶剂中,经过旋转蒸发除去有机溶剂而形成磷脂膜,最后经水化即可得到脂质体。但这样的脂质体往往粒径较大而且分布不均匀。为了改善这一缺陷,在磷脂膜水化时常常采取探头超声、微射流、高压均质、加压挤出等手段来使脂质体粒径分布更加均匀。
你觉得呢?我不知道我说的对不对。你需要超声。
Life is a journey, so enjoy yourself.
2楼2013-10-09 14:37:42
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筱包子

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
michaelzang: 金币+15, ★★★很有帮助 2013-11-28 15:43:30
水化不下来的话可以在你们PBS里面加点吐温或者F-68吧。我之前做也有这个问题,还有就是你的成膜不好的话也可能水化不好,薄膜法比较关键的是成膜性。最后取出超声就可以称单孔脂质体了。
天道酬勤。
3楼2013-11-28 09:15:40
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michaelzang

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 筱包子 at 2013-11-28 09:15:40
水化不下来的话可以在你们PBS里面加点吐温或者F-68吧。我之前做也有这个问题,还有就是你的成膜不好的话也可能水化不好,薄膜法比较关键的是成膜性。最后取出超声就可以称单孔脂质体了。

谢谢
4楼2013-11-28 15:43:10
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