24小时热门版块排行榜    

查看: 2433  |  回复: 18
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

lantianjesus

新虫 (小有名气)

[交流] 做吸附材料时,出现了很多问题,希望高手提供宝贵意见 已有4人参与

以前从未接触吸附领域,很多都不懂,近期实验出现了很多问题,希望虫友指教:
1. 我用紫外法测吸附蛋白质浓度,结果做了好几次,吸附后比吸附前浓度还大,蛋白质溶液用实验室超纯水机产水配置,PH6.6。是不是必须用缓冲液呢?用哪种缓冲液比较好呢?
2. 再做蛋白质标准曲线时候,我是用1mg/mlBSA溶液,稀释不同倍数(约0-1mg/ml)后侧OD值,为什么线性很差呢?呈指数形式。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lantianjesus

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by qlw4567 at 2013-10-10 08:12:50
蛋白质一般都非常脆弱,容易变性,在变性过程中,蛋白质外面所含的生色基团有所不同,甚至能超过你吸附后的量,所以做蛋白质实验最基本的要求是对其达到稳定。缓冲溶液是最好也是常用的稳定蛋白质体系,一般有磷酸类 ...

我改用了缓冲液体系,许多文献所报道的方法,可蛋白质含量还是高于吸附前的,我也试了试是不是吸附材料有干扰也没发现,会不会是因为摇床与离心作用过大,导致的呢?
5楼2013-10-10 16:57:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 19 个回答

qianye325326

铜虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
异氰酸酯: 金币+1, 感谢交流 2013-12-09 10:39:48
最好采用缓冲溶液,这样可以最大限度的避免蛋白变性,吸附后吸光度增加可能是由于吸附材料上杂质溶出或者蛋白变性造成的。
比色时应该使用石英比色皿。
2楼2013-10-08 17:43:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lantianjesus

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by qianye325326 at 2013-10-08 17:43:31
最好采用缓冲溶液,这样可以最大限度的避免蛋白变性,吸附后吸光度增加可能是由于吸附材料上杂质溶出或者蛋白变性造成的。
比色时应该使用石英比色皿。

缓冲液有很多种,会不会对我合成的吸附材料吸附能力有影响?我看的有报道上面吸附都用水,而脱附则采用缓冲液,缓冲液一般都用磷酸类缓冲液吗?还是说根据PH范围来选择配置?
3楼2013-10-09 10:44:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qlw4567

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
异氰酸酯: 金币+1, 感谢交流 2013-12-09 10:40:24
蛋白质一般都非常脆弱,容易变性,在变性过程中,蛋白质外面所含的生色基团有所不同,甚至能超过你吸附后的量,所以做蛋白质实验最基本的要求是对其达到稳定。缓冲溶液是最好也是常用的稳定蛋白质体系,一般有磷酸类、TRIS-盐酸类等。pH值有6.8、7.0、7.2,甚至更大或更小,关键是看你的要求和在你要求范围内,蛋白质是否稳定。还有做蛋白质标准曲线的时候,稀释法的确是能导致你所做的情况。
努力和媳妇一起上完博士
4楼2013-10-10 08:12:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿中国海洋大学,生物学,301分,求调剂 +5 1孙悟空 2026-03-17 6/300 2026-03-19 23:46 by zcl123
[考研] 085600材料与化工 求调剂 +14 enenenhui 2026-03-13 15/750 2026-03-19 21:53 by allen-yin
[考研] 一志愿南京理工大学085701资源与环境302分求调剂 +3 葵梓卫队 2026-03-18 5/250 2026-03-19 19:35 by 给你你注意休息
[考博] 东华理工大学化材专业26届硕士博士申请 +8 zlingli 2026-03-13 8/400 2026-03-19 16:32 by 轻松不少随
[考研] 266求调剂 +5 阳阳哇塞 2026-03-14 10/500 2026-03-19 15:08 by 阳阳哇塞
[考研] 0703化学 305求调剂 +4 FY_yy 2026-03-14 4/200 2026-03-19 05:54 by anny19840123
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂(0854都可以) +3 xbxudjdn 2026-03-18 3/150 2026-03-18 22:14 by zhq0425
[考研] 297求调剂 +8 戏精丹丹丹 2026-03-17 8/400 2026-03-18 14:30 by laoshidan
[考研] 一志愿西南交大,求调剂 +4 材化逐梦人 2026-03-18 4/200 2026-03-18 14:22 by 007_lilei
[考研] 331求调剂(0703有机化学 +7 ZY-05 2026-03-13 8/400 2026-03-18 14:13 by 007_lilei
[考研] 0854,计算机类招收调剂 +3 胡辣汤放糖 2026-03-15 6/300 2026-03-18 12:09 by 上岸上岸……..
[考研] 299求调剂 +5 △小透明* 2026-03-17 5/250 2026-03-18 11:49 by 尽舜尧1
[考博] 环境领域全国重点实验室招收博士1-2名 +3 QGZDSYS 2026-03-13 5/250 2026-03-18 11:13 by QGZDSYS
[考研] 085601求调剂 +4 Du.11 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:08 by ruiyingmiao
[考研] 278求调剂 +3 Yy7400 2026-03-13 3/150 2026-03-17 08:24 by laoshidan
[考研] 283求调剂 +3 听风就是雨; 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:41 by 热情沙漠
[考研] 326求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-15 3/150 2026-03-16 07:33 by Iveryant
[考研] 327求调剂 +6 拾光任染 2026-03-15 11/550 2026-03-15 22:47 by 拾光任染
[考研] 22408总分284求调剂 +3 InAspic 2026-03-13 3/150 2026-03-15 11:10 by zhq0425
[考研] 266求调剂 +4 学员97LZgn 2026-03-13 4/200 2026-03-14 08:37 by zhukairuo
信息提示
请填处理意见