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赵丹-1989

新虫 (初入文坛)

[求助] :cry:求助啊!急啊!初涉药代,遇到好多问题,实在进行不下去了啊。。。

1、大家用的是血清还是血浆啊?血浆的话抗凝剂用柠檬酸钠行吗?液态的,会不会有影响啊?
2、预处理时我直接甲醇沉淀蛋白,离心,取上清液进样,没有吹干复溶,没有过滤膜,这样可行吗?处理过的样品放置一会儿后浑浊是怎么回事啊?除蛋白不够彻底吗?
3、现用色谱条件下,将血清与含药甲醇混合后原来可以检测到药物,但是双峰(我们这药不太稳定,见光易分解,尤其是在液态情况下),现在同样的条件,同样的处理,色谱峰特别小,几乎检测不到啊,求解啊
4、药物浓度是反映在峰高还是峰面积呢?
5、安捷伦1200中文工作站打印报告时不能正常生成PDF文件,总显示参数错误,怎么破啊?
希望大家踊跃帮忙,小女子先谢过了。。。
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时钟555

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1 2013-09-30 08:56:25
赵丹-1989: 金币+1, 有帮助 2013-10-02 10:11:03
不好意思,能力有限回答4药物浓度是反应在峰面积上Aw/As=Cw/Cs如果你想深度了解可以看一下分析化学上面会有色谱的知识,其它真的不会

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2013-09-29 23:43:54
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君子爱才

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1 2013-09-30 08:56:29
赵丹-1989: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-10-02 10:11:42
水平有限    针对1和2,提点个人意见:
1:血清还是血浆看你个人需要    采血浆的话在取的全血中要加入抗凝剂,常用枸橼酸钠or肝素钠,液态的         我这边常用的1%的肝素钠生理盐水     100ul全血加1ul就可以了    影响可以忽略的  
2:不吹干复溶、不过滤膜也可行,只是会伤柱子,一般也不会这样操作。      处理过的样品变浑浊可能是离心转速不够导致沉淀不彻底or吸上清的时候吸到沉淀or蛋白没沉淀完全       建议:可以离心取完上清之后再离心一次;或者吹干复溶。
3楼2013-09-30 08:22:27
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赵丹-1989

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 时钟555 at 2013-09-29 23:43:54
不好意思,能力有限回答4药物浓度是反应在峰面积上Aw/As=Cw/Cs如果你想深度了解可以看一下分析化学上面会有色谱的知识,其它真的不会

嗯,谢谢啦
4楼2013-09-30 08:47:58
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赵丹-1989

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 君子爱才 at 2013-09-30 08:22:27
水平有限    针对1和2,提点个人意见:
1:血清还是血浆看你个人需要    采血浆的话在取的全血中要加入抗凝剂,常用枸橼酸钠or肝素钠,液态的         我这边常用的1%的肝素钠生理盐水     100ul全血加1ul就可以了 ...

嗯,好的。我用的是10000r,10min离心,有没有可能是转速太多导致药物析出了呢?因为药的溶解性不好,稳定性也不行
5楼2013-09-30 08:51:59
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wm彼岸花

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
karl2100: 金币+1, 谢谢回复! 2013-09-30 11:52:52
赵丹-1989: 金币+1 2013-10-02 10:12:30
预处理时我直接甲醇沉淀蛋白,离心,取上清液进样,没有吹干复溶,没有过滤膜,这样可行吗?处理过的样品放置一会儿后浑浊是怎么回事啊?除蛋白不够彻底吗?血样的前处理有液液萃取和蛋白沉淀,我想你用的是蛋白沉淀,可以用这种方法,如果怕对柱子伤害比较大,可离心2次,甲醇沉淀时甲醇体积2-3倍,这样有90%以上的蛋白沉淀了,进样前样品放置浑浊是不是你样品不稳定降解的原因
6楼2013-09-30 10:30:07
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hanxizhen

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
karl2100: 金币+1, 3Q 2013-09-30 11:53:04
一般我们处理血样的时候,都是先将血浆离心得到上面的血清。抗凝剂我们都是先配好,然后用抗凝剂润湿试管烘干用的。
加油
7楼2013-09-30 10:41:46
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赵丹-1989

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by hanxizhen at 2013-09-30 10:41:46
一般我们处理血样的时候,都是先将血浆离心得到上面的血清。抗凝剂我们都是先配好,然后用抗凝剂润湿试管烘干用的。

血药浓度(Plasma Concentration)系指药物吸收后在血浆内的总浓度,包括与血浆蛋白结合的或在血浆游离的药物。
如果用血清的话,会不会有部分药物损失了?
8楼2013-09-30 10:51:59
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赵丹-1989

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by wm彼岸花 at 2013-09-30 10:30:07
预处理时我直接甲醇沉淀蛋白,离心,取上清液进样,没有吹干复溶,没有过滤膜,这样可行吗?处理过的样品放置一会儿后浑浊是怎么回事啊?除蛋白不够彻底吗?血样的前处理有液液萃取和蛋白沉淀,我想你用的是蛋白沉淀 ...

也有这方面的怀疑,可是原来同样的操作却能检测到
9楼2013-09-30 10:54:11
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