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链接转化致使T5工具质粒断裂并且重新链接，求分析
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我做的是含有DUTP的非对称PCR，产物进行链接转化后，用M13引物检测电泳无结果，且在加入孔有亮斑，测序结果显示，质粒从链接位置（293bp）断裂开，但是没有新片段接入，而且不但没有接入，从链接位置开始，之后的1880bp丢失，从1881的地方又与之前的293bp位置链接。致使整个M13下游引物位置全部丢失，当然这也就是为啥电泳无结果的原因。 就现在质粒断裂有重新链接的结果，找不出一个合理的原因，希望有过类似经历的大神给予指点。 |
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