应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 大肠杆菌中beta-半乳糖苷酶的困惑
51/1返回列表
查看: 2933  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

xiaoganghehe

铜虫 (著名写手)

[交流] 大肠杆菌中beta-半乳糖苷酶的困惑

小弟是学材料的，对微生物这块一窍不通，但老师要求我做微生物传感器，我也只能硬着头皮做了。
      最近有个想法，通过颜色的变化来反应金属离子的毒性。无意中看到有人用ONPG来检测beta-半乳糖苷酶的活性，并且文献上说对大肠杆菌而言beta-半乳糖苷酶是胞内酶。然后设想：金属离子能改变大肠杆菌细胞壁的通透性，通透性的改变能使细胞内的beta-半乳糖苷酶释放到细胞外。而beta-半乳糖苷酶可以催化水解ONPG，生成黄色的物质，该黄色物质在波长420nm处存在特征吸收峰。那么根据颜色的深浅及峰的强度就能判断出金属离子对大肠杆菌的毒性。
      为了使大肠杆菌产生beta-半乳糖苷酶，我在培养基中加入乳糖。培养后，用0.8%的NaCl溶液清洗离心分离，最后将细菌沉淀分散到PBS溶液中。但令人尴尬的是，即使在不存在金属离子的情况下，往菌液中加入ONPG，就可以观察到明显的黄色变化，并且在波长420nm处可以观察到水解产物的特征吸收峰。
     因此很困惑：beta-半乳糖苷酶是胞内酶还是胞外酶？是不是有的大肠杆菌中beta-半乳糖苷酶是胞内的，而有的则是胞外的？该如何理解胞内酶和胞外酶？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2013-09-24 13:47:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mizhoulong

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
xiaoganghehe: 金币+3 2013-09-26 15:38:26
关于这个问题，我回到了好几次了，

学过生化的都知道乳糖操纵子，可能仅仅是应付考试而已，学过就忘了。

beta-半乳糖苷酶实际上还需要另外两个酶组成beta-半乳糖苷酶转运体系。

这体系中有一个通透酶，可以将底物从胞外转运到胞内。

即使没有这个转运过程，一些现在未知的机制也可能是属于胞内酶同样表达出胞外酶的活性。

所以，你的改变膜通透性的思路是不合适的。

[ Last edited by mizhoulong on 2013-9-26 at 14:48 ]
赞一下 回复此楼
9楼2013-09-26 14:46:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答

547star

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
xiaoganghehe: 金币+2, 有帮助，谢谢这位虫友 2013-09-25 07:45:26
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助！ 2013-09-25 16:24:30
即使是胞内酶，底物可以进入细胞，被反应后，显色产物也可以从细胞出来。
赞一下 回复此楼
2楼2013-09-24 22:05:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuyuexinfei

木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助！ 2013-09-25 16:24:41
有道理，我们也做个这个实验，也发现了这个现象
赞一下 回复此楼
4楼2013-09-25 10:54:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoganghehe

铜虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by liuyuexinfei at 2013-09-25 10:54:16
有道理，我们也做个这个实验，也发现了这个现象

是吗？！您能具体描述一下吗？
赞一下 回复此楼
5楼2013-09-25 11:04:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 267一志愿南京工业大学0817化工求调剂 +6 SUICHILD 2026-03-12 6/300 2026-03-17 09:24 by 雾散后相遇lc
[考研] 0854控制工程 359求调剂 可跨专业 +3 626776879 2026-03-14 9/450 2026-03-16 17:42 by 626776879
[考研] 085600材料与化工 求调剂 +13 enenenhui 2026-03-13 14/700 2026-03-16 15:19 by 了了了了。。
[考研] 材料工程327求调剂 +3 xiaohe12w 2026-03-11 3/150 2026-03-14 20:20 by ms629
[考研] 289求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-14 6/300 2026-03-14 18:58 by userper
[考研] 中科大材料专硕319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-13 3/150 2026-03-14 18:10 by houyaoxu
[考研] 材料080500调剂求收留 +3 一颗meteor 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:54 by peike
[考研] 331求调剂（0703有机化学 +5 ZY-05 2026-03-13 6/300 2026-03-14 10:51 by Jy?
[考研] 复试调剂 +9 Copy267 2026-03-10 9/450 2026-03-13 23:45 by userper
[考研] 336求调剂 +6 Iuruoh 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:06 by JourneyLucky
[考研] 329求调剂 +3 miaodesi 2026-03-12 4/200 2026-03-13 20:53 by 18595523086
[考研] 26调剂/材料科学与工程/总分295/求收留 +9 2026调剂侠 2026-03-12 9/450 2026-03-13 20:46 by 18595523086
[硕博家园] 085600 260分求调剂 +3 天空还下雨么 2026-03-13 5/250 2026-03-13 18:46 by 天空还下雨么
[考研] 求调剂 +3 程雨杭 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:06 by JourneyLucky
[论文投稿] 投稿问题 5+4 星光灿烂xt 2026-03-12 6/300 2026-03-13 14:17 by god_tian
[考研] 0856化学工程280分求调剂 +4 shenzxsn 2026-03-11 4/200 2026-03-13 11:55 by ymwdoctor
[考研] 0856化工原理 +6 z2839474511 2026-03-10 6/300 2026-03-13 10:41 by houyaoxu
[考研] 工科0856专硕化学工程269能调剂吗 +10 我想读研11 2026-03-10 10/500 2026-03-13 10:14 by Yuyi.
[考研] 研究生招生 +3 徐海涛11 2026-03-10 7/350 2026-03-12 14:26 by 徐海涛11
[考博] 26申博求助 +3 跳跃饼干 2026-03-10 4/200 2026-03-10 21:15 by Tntcnn
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭