应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 其他 » 求助酶分离时透析缓冲液的配置？急急急！！！
51/1返回列表
查看: 1323  |  回复: 4
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

mepeng87

铜虫 (小有名气)

[求助] 求助酶分离时透析缓冲液的配置？急急急！！！

粗酶液经硫酸铵沉淀后，想借助透析除盐，之前用了超纯水和PH为8的PBS作为透析液都使酶的活性降低很多。求助怎么办呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2013-09-23 13:27:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mepeng87

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zybpxy at 2013-09-23 14:52:27
透析除盐时的条件相对酶来说有点恶劣，是不是因为透析时间过长温度过高导致酶失活
另外，你需要根据酶来选择透析袋，要不然可能连酶一起出去了

时间是过夜，温度我刻意控制了一下，最高20度左右，不至于使酶失活，透析袋是五千的也不高，感觉是不是缓冲液的问题，这个是碱性酶，活性在PH为11最高，但透析液的PH总不能也调到11吧，所以很愁人，您有什么建议没有？
赞一下 回复此楼
3楼2013-09-23 20:14:21
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

zybpxy

铁杆木虫 (著名写手)

致斋大人

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
透析除盐时的条件相对酶来说有点恶劣，是不是因为透析时间过长温度过高导致酶失活
另外，你需要根据酶来选择透析袋，要不然可能连酶一起出去了
赞一下 回复此楼
走的太远，别忘了为何出发
2楼2013-09-23 14:52:27
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

想去看海

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zybpxy: 金币+2, 鼓励交流 2013-09-24 17:45:11
透析要在4℃条件下进行，缓冲液只要不是极高或极低的PH都没有太大问题，一般7-8之间。透析难免会有一些酶活力损失，如果对酶活有精细要求的话可以分几个pH梯度透析
赞一下 回复此楼
4楼2013-09-23 23:47:15
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

calledone

至尊木虫 (职业作家)

小小木虫

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
因为您没有提及所透析带酶具体是哪种以及原料，建议你再查看下文献，详细了解下有无以下可能：
（1）该酶是带有辅基的结合酶，透析时金属离子逃出，导致活力丧失。这种情况下可以适当补充该类金属离子以保障活力。
（2）粗酶液中是否存在蛋白酶？如果有蛋白酶的话，可能会降解目标酶，导致活力不可逆丧失或降低。
祝顺利。
赞一下(1人) 回复此楼
日行一善，善行一生。
5楼2013-09-25 00:04:33
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭