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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 生物效应评价 » 求助各位是如何将细胞接种在膜上的
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fistwl

新虫 (小有名气)

[求助] 求助各位是如何将细胞接种在膜上的

材料做成膜之后要将细胞接种在上面测增殖，但是我尝试了好几次结果都很差。
第一次是直接材料打成48孔板大小，然后用硅胶环压住，加上200ul细胞悬液，结果发现细胞都会流到膜和板子之间，而且每个孔流的还不一样。
第二次是在第一次基础上改进了一下，将细胞悬液稀释到400ul，这样即使流下去，细胞数目也少。结果不行
第三次是将细胞浓缩在10ul里，小心加在膜中间，过1.5小时后，小心补足培养液，这次我满以为会好，结果还是不行，SD值很大
各位都是如何操作了，还请指教
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1楼2013-09-23 09:58:19
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luo0622

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Xiang_cai145 at 2013-09-23 11:12:21
我做的时候用的24孔板，膜要比空小一圈，然后用50微升。4个小时后补培养基，感觉除了长得不均匀外，其他还可以。

请问您是具体的实验步骤是什么呢？一开始膜是不是要用细胞培养液浸泡呀，用多少体积的呢？之后测吸光度的步骤是什么呢？
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15楼2016-09-07 20:48:27
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Xiang_cai145

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
markar: 金币+1, 感谢回帖交流！ 2013-09-23 20:03:23
我做的时候用的24孔板，膜要比空小一圈，然后用50微升。4个小时后补培养基，感觉除了长得不均匀外，其他还可以。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2013-09-23 11:12:21
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淘气百合

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
markar: 金币+1, 感谢回帖交流！ 2013-09-23 20:03:31
先把细胞悬液接种到材料上培养一天，第二天把材料换一个孔继续培养，细胞就在材料上了
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3楼2013-09-23 13:20:06
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淘气百合

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Xiang_cai145 at 2013-09-23 11:12:21
我做的时候用的24孔板，膜要比空小一圈，然后用50微升。4个小时后补培养基，感觉除了长得不均匀外，其他还可以。

要看你的材料细胞能不能黏附上去
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4楼2013-09-23 13:21:08
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