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惊鸿孤梦

铁杆木虫 (小有名气)

菁菁

[求助] 【求助】圆二色信号强度太低

最近在做人胰岛淀粉样多肽的圆二色,但是无论怎么做信号强度都很小。把多肽浓度从16μM提高到了32μM,皿的路径长度也从0.2mm换到了1mm,狭缝从2nm改成了5nm,可是信号强度几乎就没怎么增大,也就零点几的样子。这是怎么回事呢?是我的样品有问题?还是仪器有问题?PS:我的样品里有1-2%的六氟异丙醇,但是文献里也有这么做的,不知道会不会有这么大影响。还有我们的圆二色换过一次灯,之后信号抖动就比较厉害了,不知道是不是仪器的原因。。。
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惊鸿孤梦

铁杆木虫 (小有名气)

菁菁

引用回帖:
8楼: Originally posted by hl16010921 at 2013-11-16 20:28:02
1.离心试试,看有无改善。2.由于淀粉样蛋白的聚集形态影响其性质,这可能是LZ关心的,所以上清的圆二不一定反应了真实的构象,只能反应可溶部分的构象。3.没做过不溶样品的圆二,不知该如何处理,LZ试试ACS数据库中 ...

非常感谢~
9楼2013-11-18 22:27:58
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e2zhanbo

铜虫 (初入文坛)

在哪里做的,什么仪器型号?
有测过紫外吗?
2楼2013-09-30 12:48:21
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惊鸿孤梦

铁杆木虫 (小有名气)

菁菁

引用回帖:
2楼: Originally posted by e2zhanbo at 2013-09-30 12:48:21
在哪里做的,什么仪器型号?
有测过紫外吗?

仪器是Jasco公司的J-810,只测过一次紫外,在210nm的吸收比较大,其它波长下吸收都不大。。。
3楼2013-11-04 17:53:34
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hl16010921

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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惊鸿孤梦: 金币+20, ★★★★★最佳答案 2013-11-16 16:03:13
1.LZ可以测个常用蛋白BSA之类的看信号如何,如果正常,就是样品的问题。不正常就是机器的问题。
2.园二可以测紫外,将紫外图谱和园二谱一比较就知道了。紫外和园二都低,则样品太少或机器出问题了(淀粉样蛋白溶解性不好可能有影响。紫外正常园二低,样品呈对称状无各向异性,样品的问题
4楼2013-11-05 10:50:08
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