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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教几个个比较白痴的问题?
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gimi2

[交流] 请教几个个比较白痴的问题?

在做转基因的时候，克隆载体的目的就是让目的基因克隆，也就是在数量上增加，PCR不也有这个功能吗？为什么还要用克隆载体？
     表达载体是让目的基因整合到受体细胞中复制并表达，他也有复制的功能，那为什么还用克隆载体，直接把目的基因构建到表达载体上面不就行了吗?
在做转基因的时候是不是两个载体都要用上的?
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1楼 2007-11-26 12:24:48
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puma2003

铁杆木虫 (著名写手)
借用载体上的多克隆位点？

[ Last edited by puma2003 on 2007-11-26 at 20:06 ]
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3楼2007-11-26 20:04:38
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caohai_ning

哈哈哈

是啊!不过那样做肯定有那样做的道理啊!你照做吧!我也很想知道这个原因啊!
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2楼2007-11-26 13:56:14
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jfllfj

金虫 (小有名气)
PCR是有扩增载体的功用，但是较之使用克隆载体在细菌体内扩增 成本是比较高的，PCR要耗费引物、Taq 酶等，当然 PCR 反应的条件体系也需要摸索。
并不是所有的载体都是高拷贝的，而表达载体的拷贝量往往都是比较低的，但是克隆载体的拷贝量就比较高，如果你想要得到都拷贝的目的基因，用克隆载体是比较明智的。
是不是都要使用，要是你的情况而定，如果你目的基因的量可以满足连接等的需要，你就不必克隆到克隆载体上，而可以直接连到表达载体上，做表达检测。
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4楼2007-11-26 20:28:47
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gimi2

固相微萃取

固相微萃取的纤维头可以在有机溶剂中萃取微量物质吗？
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5楼2008-11-19 14:25:02
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