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[交流] 请教几个个比较白痴的问题?

在做转基因的时候，克隆载体的目的就是让目的基因克隆，也就是在数量上增加，PCR不也有这个功能吗？为什么还要用克隆载体？
表达载体是让目的基因整合到受体细胞中复制并表达，他也有复制的功能，那为什么还用克隆载体，直接把目的基因构建到表达载体上面不就行了吗?
在做转基因的时候是不是两个载体都要用上的?

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1楼 2007-11-26 12:24:48

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哈哈哈

是啊!不过那样做肯定有那样做的道理啊!你照做吧!我也很想知道这个原因啊!

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2楼2007-11-26 13:56:14

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puma2003

铁杆木虫 (著名写手)

应助: 16 (小学生)
金币: 6434.2
红花: 10
帖子: 2798
在线: 757.5小时
虫号: 424442
注册: 2007-07-22
性别: GG
专业: 临床生物化学检验

借用载体上的多克隆位点？

[ Last edited by puma2003 on 2007-11-26 at 20:06 ]

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3楼2007-11-26 20:04:38

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jfllfj

金虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 652
帖子: 55
在线: 45.4小时
虫号: 438259
注册: 2007-09-18
专业: 生物大分子结构与功能

PCR是有扩增载体的功用，但是较之使用克隆载体在细菌体内扩增成本是比较高的，PCR要耗费引物、Taq 酶等，当然 PCR 反应的条件体系也需要摸索。
并不是所有的载体都是高拷贝的，而表达载体的拷贝量往往都是比较低的，但是克隆载体的拷贝量就比较高，如果你想要得到都拷贝的目的基因，用克隆载体是比较明智的。
是不是都要使用，要是你的情况而定，如果你目的基因的量可以满足连接等的需要，你就不必克隆到克隆载体上，而可以直接连到表达载体上，做表达检测。

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4楼2007-11-26 20:28:47

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